Нажмите "Enter", чтобы перейти к контенту

Уровни сыворотки хемокина MCP-1 у пациентов с ишемическим инсультом и инфарктом миокарда

Serum Levels of the MCP-1 Chemokine in Patients With Ischemic Stroke and Myocardial Infarction
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1526470/

Микробная активность воспалительных клеток
участвуют в патогенезе связанных с атеросклерозом
таких как ишемический инсульт и инфаркт миокарда. В
это исследование, кандидат хемокин, хемоаттрактант моноцитов
белка (MCP) -1, исследовали у пациентов с обоими
вышеупомянутые проявления атеросклеротического воспаления.
Уровни MCP-1 в сыворотке определяли с помощью ELISA в 40 здоровых,
(C), 40 пациентов с ишемическим инсультом (IS) и
у 64 пациентов с инфарктом миокарда (ИМ). статистическая
анализ использовал тест Манна-Уитни, точный тест Фишера и
Ранговая корреляция Спирмена (P <0,05). По сравнению с контролем (C, средний / интерквартильный диапазон: 239/126 пг / мл), MCP-1 уровни сыворотки были увеличены в обеих исследованных когортах пациентов (IS: 384/370, P <.001; MI: 360/200, P <.002). Был существенная изменчивость уровней сыворотки MCP-1, особенно в IS. Никаких связей между уровнями хемокинов не наблюдалось и факторы риска атеросклероза (гипертония, диабет, курение, и потребление алкоголя), а MCP-1 также не относится к возрасту или Пол. Возвышение MCP-1 в обращении пациентов с связанные с атеросклерозом осложнения подразумевают этот CC хемокинового лиганда (CCL) 2 в воспалительных процессах, которые способствуют патогенезу инфаркта миокарда и ишемии Инсульт. Дальнейшие исследования, включая стратификацию пациентов, однако необходимо оценить, можно ли использовать MCP-1 для клиническое лечение пациентов с этими заболеваниями.

Ишемический инсульт (ИБ) и инфаркт миокарда (ИМ)
связанные с атеросклерозом осложнения, которые являются ведущими
причины смертности и инвалидности во всем мире [1].
IS и MI имеют общие функции, но в то же время существуют
различия во многих факторах риска, по крайней мере количественные, если не
качественные. По сравнению с инфарктом миокарда, пациенты с инсультом
по крайней мере на 10 лет старше, заболеваемость среди мужчин среднего возраста
по сравнению с женщинами меньше, а повышение артериального давления
более сильно связан с инсультом, тогда как увеличение плазмы
холестерин менее сильно связан с инсультом [2].

Недавние исследования показали, что аберрантный иммунный ответ развивается во время
как ИС, так и ИМ, которые вредны и способствуют гибели клеток
после оскорблений [3, 4,
5]. Обе патологии характеризуются
путем экспрессии провоспалительных цитокинов, молекул адгезии,
и, что важно, хемокины, которые организуют инфильтрацию
лейкоцитов в область инфаркта, экспрессию повреждающих агентов и
активация системы комплемента (обзор см. в [6,
7]).

Хемокины представляют собой низкомолекулярные полипептиды, которые, кроме
другие функции, оказывают сильное хемотаксическое и активирующее действие
по конкретным популяциям лейкоцитов [8]. В последнее время
возрастает интерес к применению биохимии хемокинов в
клиника, включая атеросклероз [9]. CC хемокиновый лиганд
(CCL) 2, более широко известный как моноцитарный хемоаттрактантный белок-1
(MCP-1), является мощным мононуклеарным аттрактантом [10]. В нем есть
ранее участвовали в разработке как ИС, так и МИ.
Например, в экспериментах на животных высокие уровни мРНК MCP-1 имеют
были обнаружены в мозге через 6 часов после церебральной ишемии.
Максимальное выражение этого хемокина наблюдалось между 12
часов и 2 дней [11, 12].
Экспрессия мРНК MCP-1 была
активируется в области инфаркта после ИМ таким же образом, как в
IS [13, 14].

Большинство данных о вовлечении цитокинов и хемокинов в
патогенез ИБ и ИМ был получен из исследований на животных.
В настоящее время больше внимания уделяется исследованиям с использованием человека
предметы. В этом контексте кровь становится бесценной мишенью для
таких исследований, из-за его относительной доступности. В последнее время
было показано, что уровни нескольких цитокинов повышены в
кровь пациентов с ИБ и ИМ [15,
16, 17,
18]. Однако,
данные по MCP-1 недостаточны, особенно в штрихах. Мы, следовательно,
выполнили настоящее исследование, чтобы предоставить дополнительные данные о
участие MCP-1 в МИ, а именно в ИС. Сделав это, мы пожелали
в дополнение к существующим исследованиям, нацеленным на оценку хемокина
воспалительный ответ в патогенезе этих двух
связанные с атеросклерозом осложнения.

Сорок пациентов с ИБ (17 женщин, возраст [лет, среднее ± SD]: 67,5 ± 10,5) и 64 пациента с ИМ (8 женщин, возраст 55 ± 8,8)
были введены в исследование. Пациенты с одновременными заболеваниями или
условия, препятствующие проведению исследования, такие как
инфекции, злокачественные новообразования и инфекции иммунодепрессантов
исключены из исследования.

Диагностика ИБ основывалась на клинической истории и неврологическом
и был подтвержден CT. На КТ-экспертизе все
пациенты с инсультом представляли анатомически значимые области гипотензии в
подкорковые части полушарий головного мозга.

Диагноз ИМ определяли исходя из наличия> 30 минут
постоянной боли в суставах, высота сегмента ST> 2,0 мм на
менее 2 непрерывных ЭКГ и более чем 3-кратное увеличение
уровни креатинкиназы в сыворотке.

Что касается факторов риска, 44% ИМ и 50% пациентов с ИБ
гипертония, 18% ИМ и 9% пациентов с ИБС имели диабет
mellitus, 54% ИМ и 18% пациентов с ИБ сообщили
как текущие курильщики, а 8% ИМ и 5%
пациенты сообщили о себе как о потребителях алкоголя. В
Кроме того, 7% пациентов с ИБ ранее имели ишемическое сердце
болезни.

Сорок здоровых субъектов (7 женщин, 52 ± 3), не имеющих клинических
признаки инфекции, другие системные заболевания и негативная семья
история ИС или ИМ служила контрольной популяцией.

Венозные образцы крови были получены у пациентов с ИБ и ИМ внутри
Через 24 часа после начала заболевания и один раз от контролей. Образцы сыворотки
хранили при -70 ° С до дальнейшего анализа.

IS были завербованы в Медицинском центре Эребуни, Ереван,
Армения; У пациентов с ИМ был диагностирован больница факультета
Оломоуц, Чешская Республика. Все субъекты дали свое информированное согласие
для участия в этом исследовании. Утверждены местные этические комитеты
исследование.

Уровни белка MCP-1 в сыворотке крови, полученные от участников исследования
были измерены с использованием твердофазной сэндвич-фермент-связанной
иммуносорбентный анализ (MCP-1 Quantikine ELISA kit, R & D systems,
Абингдон, Великобритания). Вкратце, 100 мкл дублированных образцов или
(рекомбинантный человеческий MCP-1) инкубировали (2 часа при
комнатная температура) в лунках, предварительно покрытых первичной антигуманью
MCP-1. После инкубации лунки промывали три раза
и поликлональные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена
против MCP-1 (в течение 2 часов при комнатной температуре).
Наконец, раствор субстрата тетраметилбензидина применяли для
30 минут и после прекращения реакции на 2 М
серной кислотой, поглощение измеряли при 450 нм (с
коррекция при 540 нм). Данные были оценены с помощью KIM-E
программное обеспечение (USOL, Прага, Чешская Республика); предел обнаружения
анализ MCP-1 составлял 5,0 пг / мл.

Программное обеспечение SPSS 11 (SPSS Inc, Chicago, Ill) использовалось для расчета
основные статистические параметры и выполнить Манн-Уитни
U-тест для проверки различий в уровнях белка хемокинов
между ИМ, ИС и контрольными группами, а также для дальнейшего
субанализ. Точный критерий Фишера использовался для сравнения различий
в качественных параметрах между группами IS и MI. Спирмена
ранговая корреляция была использована для оценки взаимосвязи между возрастом и
Уровни MCP-1. Данные о уровнях MCP-1 представлены в виде медианы
[межквартильный диапазон (IQR)]. P <0,05 статистически значимый.

В этом исследовании иммунореактивный белок MCP-1 определяли в
периферической крови пациентов с ИМ и ИБ.

До анализа хемокинов различия в факторах риска среди
наши исследовательские группы были оценены. У пациентов с ИМ было в среднем 12
лет моложе (P <.0001). Кроме того, в соотношение мужчин и женщин (IS, 42% против MI, 12%, P <.0001) и среди курильщиков (МИ, 54% против ИБС, 18%, Р <.0001). Число больных сахарным диабетом в 2 раза выше MI по сравнению с ИС, но эта разница не достигала значимость (MI, 18% против IS, 9%, P> 0,05). Исследование
группы не отличались в отношении гипертонии и алкоголя
потребление.

По сравнению с контрольными субъектами (медиана [IQR]: 239 [126] пг / мл),
уровни белка MCP-1 повышались у пациентов обоих
(рис. 1). Это увеличение было более очевидным
в группе IS (384 [370] пг / мл), для которой также в большей степени
межличностной изменчивости, чем среди пациентов
с MI (360 [200] пг / мл). Хотя только 10/40 (25%) контроля
у субъектов был уровень MCP-1 выше, чем 314 пг / мл (75-й процентиль
контрольная группа), у пациентов с ИБ эта пропорция достигала
68% (27/40), а в группе MI — 61% (39/64).
различия между исследуемыми группами пациентов и контрольными группами,
следовательно, достигли большого значения (IS против C, P <.001; MI против C, P <.002), в то время как между сами группы пациентов (IS против MI, P> 0,05).

Кроме того, мы исследовали, влияет ли на белок MCP-1
факторы риска ИМ и ИБ. Сравнивали уровни хемокинов в сыворотке крови
между пациентами с диабетом и без него, гипертонией; курильщики
и некурящие; а также группы, делящиеся на основе алкоголя
потребление. Анализ данных показал, что ни один из вышеперечисленных рисков
факторы влияли на циркуляцию уровней MCP-1 у пациентов
с MI и / или IS (таблица 1). Кроме того, никакой гендерный
Эффект уровней MCP-1 проявлялся и в обеих изученных группах
как в контрольной группе (IS
мужчины и женщины: 417 [400] по сравнению с 253 [296], P> 0,05; MI мужчин и женщин: 343 [203] против 397 [300],
P> 0,05; C мужчин и женщин: 244 [125] против 234
[93], P> 0,05), и не было никакой корреляции между возрастом и
хемокинов (IS: rs = -0,009, P> 0,05,
MI: rs = -0,06, P> 0,05,
C: rs = 0,168, P> 0,05).

Это исследование предназначалось для оценки хемокина MCP-1 в
циркуляция пациентов с инфарктом миокарда и ишемией
Инсульт. Эти два осложнения, связанные с атеросклерозом,
много общего, но в то же время они имеют по крайней мере
количественные, если не качественные различия в их факторах риска
[2]. Эта тенденция сохраняется в характеристиках наших пациентов:
наши пациенты с ИБС были старше и различной частотой у мужчин
и женщины менее выражены в ИШ по сравнению с ИМ. Также является
пациенты были более склонны к гипертонии, чем пациенты с ИМ.
Таким образом, наличие этих признаков подтверждает,
группы были правильно созданы и отражают реальную ситуацию с
IS и MI фенотипы. Этот факт важен для интерпретации
хемокинов.

Наши данные показали почти двукратное увеличение уровней MCP-1 в сыворотке крови в
пациентов с ИМ и ИБ по сравнению с контрольной группой здоровых
предметы. Мы также обнаружили, что уровни MCP-1 в сыворотке не различались
между ИБ и ИМ пациентами. Наконец, уровни этого хемокина
не были подвержены влиянию известных факторов риска для этих заболеваний, таких как
как гипертония, диабет, курение или употребление алкоголя.

При инфаркте миокарда повышение циркулирующего MCP-1 было
уже сообщалось [19,
20, 21] и,
поэтому наши выводы
увеличение MCP-1 у наших пациентов с ИМ подтвердило
природа. Однако редкие сообщения об этом хемокине в
ишемический инсульт противоречивы [22,
23]. Лоси и Заремба
[22] сообщили, что уровни MCP-1 в крови не были увеличены в
его группа из 23 пациентов с ИБ. В отличие от
результаты, Reynolds и др. [23] продемонстрировали возвышение
MCP-1 хемокин в крови из большой группы из более чем 200
пациентов с инсультом. Это расхождение может произойти из-за небольшого числа
предметы, включенные в исследование Лози и Зарембы [22] и
возможно, также благодаря заметной изменчивости циркулирующих уровней MCP-1.

Существует, по меньшей мере, два механизма, с помощью которых наблюдается
повышение уровня белка MCP-1 в обращении пациентов
с ИБ и МИ может быть достигнуто. Во-первых, это может быть прямой
следствие развития атеросклероза. Основные источники
MCP-1 представляют собой эндотелию и макрофаги, подобные клеткам [24], которые
как известно, играют значительную роль в атеросклерозе
развития и формирования бляшек. Исследования in vitro показали
что эндотелиальные клетки способны продуцировать MCP-1 в ответ на
LDL важный фактор запуска атеросклероза [25,
26].

Во-вторых, увеличение уровней MCP-1 может отражать развитие
воспалительный ответ в сердце и мозге. Многочисленные исследования
животные модели инсульта показали, что MCP-1 и MIP-1beta являются двумя
основные хемокины, которые организуют инфильтрацию крови
моноцитов и лимфоцитов в ишемическую область. Усиление
Уровни мРНК MCP-1 обнаруживаются как в постоянных, так и в переходных
модели очаговой ишемии [11,
12]. Кроме того, исследование Hughes et
al [27] продемонстрировал, что дефицит MCP-1 является защитным в
модель мышиного инсульта. Те же процессы происходят в сердце
во время ИИ [13, 14].
Кроме того, было продемонстрировано
что мыши, лишенные CCR2, первичный рецептор для MCP-1, показали
значительное ухудшение инфильтрации моноцитов, снижение
Экспрессия TNF-альфа и матриксных металлопротеиназ при инфаркте
в экспериментальном MI [28].

Наши данные показали, что повышение MCP-1 в крови является общим
для MI и IS. Это может предполагать, что в
связанные с атеросклерозом осложнения, воспалительный ответ,
имеют некоторое сходство и не зависят от органа. Эта
интерпретация вписывается в другие текущие отчеты [29,
30, 31],
включая недавнее наблюдение примерно в 2 раза
MCP-1 в крови пациентов с периферической артериальной болезнью
[32].

Неожиданно в нашем исследовании ни один из четырех не исследовал общий риск
факторы MI и IS не влияют на уровни MCP-1 в сыворотке. В
количество предыдущих исследований у пациентов с инфарктом миокарда,
ассоциация уровней MCP-1 с несколькими факторами риска, такими как
гипертонии [33] и
диабет [20].
Однако это были исследования, основанные на широком населении, где даже
могут быть выявлены незначительные различия. Например, в исследовании
de Lemos и др. [20] было зарегистрировано более 2000 предметов и
таким образом, авторы смогли определить довольно незначительную разницу
6%. Поэтому возможно, что в нашей
относительно небольшая численность пациентов 64 пациентов с ИМ, различия
аналогичной величины могут быть не видны. Что касается пациентов с
ишемического инсульта, не было исследований по влиянию риска
факторов на уровнях MCP-1. Поэтому мы планируем продолжить изучение
это явление, с тем чтобы его можно было оценить, если мониторинг MCP-1
уровни сыворотки могут быть включены в алгоритм управления
пациентов с ИБ как независимый маркер.

В заключение наши данные расширяют предыдущие наблюдения, показывающие, что
MCP-1 играет важную роль в развитии воспалительных реакций
при инфаркте миокарда и ишемическом инсульте. Дальнейшая работа,
однако необходимо более точно определить соотношение
между МКП-1 и клиническим течением исследуемых заболеваний.
Особое внимание следует уделять стратификации пациентов с целью
установить клиническое использование измерений MCP-1, а именно:
ишемический приступ.

Эта работа была поддержана агентством внутреннего гранта чешского
Министерство здравоохранения (IGA MZCR NI / 7308-3), а также
Финансирование правительства Чехии (МСМТ 151100002). Первым автором был
при поддержке стипендии INAS Young Scientist (YSF-2002-0046).

Моноциты
уровень хемоаттрактантного белка (MCP) -1 (пг / мл) в сыворотке
пациенты с инфарктом миокарда (ИМ, n = 64), ишемический инсульт
(IS, n = 40) и здоровых, контрольных субъектов (n = 40). Данные
выраженные в виде площадок с усами; поле представляет собой 25-75-е
процентили, медианная обозначается полосой поперек коробки,
усы на каждой коробке представляют собой 10-90-й процентили.
* P <.002 по сравнению с контрольной группой.

Различия в уровнях MCP-1 (пг / мл) в сыворотке
пациенты с ИБ и ИМ, отражающие наличие (+) или отсутствие (-)
известных факторов риска.

Комментариев нет.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *