Нажмите "Enter", чтобы перейти к контенту

Трансконъюнктивальное проникновение митомицина С

Transconjunctival penetration of mitomycin C
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2636116/

Исследование проводилось для оценки трансконъюнктивального проникновения митомицина С (MMC) в препарат Тенона
ткани после нанесения на неповрежденную конъюнкцию перед обычной трабекулэктомией.

Основанные на институте серии случаев.

В 41 глазах 41 пациента MMC (0,4 мг / мл в течение 3 мин) применяли по отношению к неповрежденным
конъюнктивы перед началом трабекулэктомии. Капсула Тенона непосредственно под местом нанесения была
вырезали во время трабекулэктомии и гомогенизировали, центрифугировали и концентрировали концентрации MMC
с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Статистический анализ выполнялся с использованием программного обеспечения для версий stata0 8.0 (STATA
Corporation, Хьюстон, Техас, США). В этом исследовании P-значения менее 0,05 считались статистически
значительное.

Средний вес образца вырезаемой ткани Тенона составлял 5,51 ± 4,42 мг (диапазон:
0,9-17,1), а средняя оценка концентрации MMC, обнаруженная в ткани Тенона с использованием ВЭЖХ, была
18,67 ± 32,36 × 10-6 моль / кг ткани (диапазон: 0,38-197,05 × 10-6). В 36 из
41 пациент (87,80%), концентрация MMC достигала более 2 × 10-6 молей / кг концентрации ткани
необходимых для ингибирования фибробластов конъюнктивы человека.

Митомицин С проникает в субконъюнктивальную ткань после применения супраконъюнктива
в течение 3 мин. Применение MMC над конъюнктурой может быть полезной альтернативой субконъюнктивам или
субкреберное применение во время рутинной трабекулэктомии и в качестве дополнения к неудачным пузырькам.

Цитостатические вещества, такие как митомицин С (MMC), были
используется внутриоперационно в качестве дополнения к трабекулэктомии.
антипролиферативные агенты (MMC и 5-florouracil) имеют
улучшили исход операций по глаукома-фильтрации. Это может быть связано либо с проявлением цитостатических эффектов
как задержка заживления ран, приводящая к длительному усилению
фильтрации или, возможно, прямого токсического воздействия на эпителий
цилиарного тела или обоих.4,7

Факторы, влияющие на антифибробластические эффекты MMC
используемая концентрация, область применения, продолжительность
применение и материал губки8. Лучший режим в терминах
концентрации, продолжительности, места и количества заявок
до сих пор не известно9 и обоснование единственной интраоперационной
было также поставлено под вопрос 10.
сообщения о местном применении MMC после трабекулэктомии
для послеоперационной фармакологической модуляции.4,6,11 Эти
отчеты показали MMC-заявку в форме актуальных
капель6 и поверхностного применения4,11, чтобы стать эффективной альтернативой
к единому интраоперационному приложению. Однако
в литературе не было проведено исследование концентрации MMC
в ткани Тенона после поверхностного применения препарата над
неповрежденная конъюнктива. Целью исследования было оценить
концентрация MMC в ткани Тенона после однократного
применение MMC.

После принятия разрешения от Совета по институциональному контролю,
это экспериментальное исследование было проведено. Исследование включало пациентов
которые были запланированы для стандартной трабекулэктомии из
С февраля 2005 года по декабрь 2005 года. Исследование проводилось
в соответствии с принципами Хельсинкской декларации. Только глаза
пациенты, не достигшие целевого внутриглазного давления (ВГД) на
максимально переносимая медикаментозная терапия (по крайней мере три актуальные
лекарства, включающие 0,5% тимолола, 0,15% бримонидина,
2% пилокарпина, 0,005% латанопроста или 0,03% биматопроста вдоль
с оральным ацетазоламидом и / или сиропом глицерина и внутривенным
маннит) были включены в это исследование. Пациенты с
история предшествующей хирургии глаукомы, скопление конъюнктивы
были исключены из исследования. После информированного согласия (см.
Приложение) и подробно объясняя процедуру, перибульбар
блок из (6 мл 2% ксилокаина и 4 мл 0,5% сенсаинаина)
была дана через кожу. Все трабекулектомии были
выполненных двумя хирургами (R.S. и V.G) с использованием лимба
конъюнктивальный лоскут, как описано Cairns.12 Целая сухая клетка
губка (Supersoak sponges, Madhu Instruments, Нью-Дели,
Индия) были пропитаны (до тех пор, пока она не полностью поглотила MMC) с
свежеприготовленные 0,4 мг / мл MMC, и затем их помещали
непосредственно над неповрежденной бульбарной конъюнкцией на предлагаемом участке
трабекулэктомии в течение 3 мин. Препарат тщательно промывали
из пальпебрального мешка с 10 мл раствора Рингера лактата.
Затем был пропущен верхний пряный стрижковый шов и 8-10 мм
был поднят лоскут с высоким лимбом. Небольшой кусочек Тенина
ткань была вырезана чуть ниже области применения,
высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)
MMC в образце проводили с использованием процедуры, описанной ниже.
Образцы были закодированы и подвергнуты оценке MMC в
отдел глазной фармакологии.

Была проведена оценка MMC из образцов ткани
в соответствии с методом, о котором сообщалось ранее с незначительной модификацией.13
Вкратце, ткани сразу же взвешивали вместе с
предварительно взвешенные микроцентрифужные пробирки по их прибытии. метанол
(Класс ВЭЖХ) добавляли в объеме 200 мкл и сохраняли
при -70 ° C до анализа. В день анализа образцы были
гомогенизируют в холодном состоянии с помощью ручной микроцентрифуги
чтобы избежать испарения метанола. образцы
затем центрифугировали при 5000 × g в течение 10 мин. Супернатант
подвергали количественной оценке по ВЭЖХ, системе термообметчивания ВЭЖХ
был использован. Мобильная фаза, содержащая фосфатный буфер (рН 6,5)
и ацетонитрил в соотношении 8: 2 об. / об. Он был перекачан
при скорости потока 1 мл / мин, и аналитическое разделение было
достигается с помощью колонны C8-Kromosil (250 x 4,6 мм, 5 мкм) (Flexit
Jour Laboratories Pvt Ltd, Пуна, Махараштра, Индия).
УФ-детектирование достигалось при 365 нм, а пиковая чистота была
проводили в диапазоне длин волн 200-400 нм, используя
специальная библиотека опций фотодиода [Рис. 1].

В вышеуказанных условиях MMC элюировали
время удерживания 6,52 мин. Предел обнаружения использования MMC
вышеуказанный способ составляет 0,427 × 10-6 моль / кг ткани.
вес образцов ткани варьировал от 0,9 до 17,1 мг с
среднее значение 5,5 + 4,42 мг (медиана 4,2).

Средняя концентрация и диапазон полученных концентраций
из полученных тканей были оценены. Концентрация
MMC, полученная из ткани, коррелировала с весом
ткани и возраста пациентов. статистический анализ
была выполнена с использованием программного обеспечения версии stata 8.0 (STATA
Корпорация). В этом исследовании P-значения менее 0,05 были
считаются статистически значимыми.

В исследование было включено 41 глаз 41 пациента. из
у 41 пациента было 28 мужчин и 13 женщин. Значение
возраст пациентов составил 45,63 ± 18,27 года (диапазон: 3-77 лет).
Среднее значение предоперационного ВГД составляло 26,61 ± 3,52 мм рт.ст.
(по максимально допустимой медицинской терапии). Из 41 пациента,
22 были диагностированы с хроническим закрытием первичного угла
глаукома, у 9 была первичная открытая угловая глаукома и 10
имели другие формы глаукомы [врожденный (1), угловой спад
(1), аномалия Axenfeld-Reigers (2), неоваскулярная глаукома
без значительной конъюнктивальной гиперемии и воспаления
контролируется на стероидах (2), связанной с вторичной глаукомой
с адгезивной лейкомой (1), управляемой виректомией
(1), синдром Стурге-Вебера (1) и афакия (1)].

Средний вес образца ткани Тенона вырезали
составляла 5,51 ± 4,42 мг (медиана 4,2 мг с диапазоном 0,9-17,1) и
средняя оценка концентрации MMC составляла 18,67 ± 32,3 ×
10-6 молей / кг ткани (диапазон: 0,38-197,05 × 10-6). В 36 из
41 пациент (87,80%), концентрация MMC выше
2 × 10-6 молей / кг ткани (концентрация, необходимая для ингибирования
человеческие конъюнктивальные фибробласты14). При статистическом анализе
корреляция между весом образца и MMC
концентрация (P = 0,2, r = 0,18) и возраст пациента и
обнаружена концентрация MMC (P = 0,3, r = 0,16) в образце
не было статистически значимым. Результаты
были обобщены в таблице 1 и на фиг. 2 и 3.

Из 41 глаз, включенных в исследование, неглубокие передние
камера (АС) была отмечена в пяти случаях. Единая процедура AC
(в стерильных условиях стерильный воздух вводили в
AC с помощью иглы 26-G под местной анестезией
с 0,5% пропаракаина) было достаточно для управления четырьмя
пять случаев с неглубоким переменным током. В одном случае после двух процедур
реформации AC, ревизия пузыря была сделана для управления мелкой
AC. Ни в коем случае не было утечки пузырька, тонкого пузыря, стойкой гипотонии,
хориоидальная отслойка, гипотоническая макулопатия или роговица
эпителиальная токсичность, отмеченная в первый послеоперационный месяц.

Митомицин С является антибиотиком, алкилирующим агентом, который действует
связывание с ДНК и ингибирование клеточного митоза и препятствует
РНК-транскрипция и синтез белка 7,15 и
обнаружено, что ингибирует пролиферацию культивируемых фибробластов человека Тенона после
кратковременная экспозиция 1-5 минут.16

Митомицин С теперь используется интраоперационно в
глаукоматозные глаза с высоким риском хирургического отказа.
Однако в некоторых глазах ощущается потребность в противогрибковом агенте
только после операции, когда субконъюнктивальные рубцы или имплантация
пузыря. Были применены капли MMC, но
были чреваты проблемами.6

Лечение ран — это сложный процесс, и есть много
между отдельными вариациями, помимо вариаций среди рас.
Даже в настоящем исследовании было большое разнообразие
количество MMC, обнаруженное в разных образцах ткани для
такое же количество концентрации применяется местно; Это должно быть
объясняется различиями в конъюнктивале и Тенне
толщина у разных особей.

Изучена фармакокинетика MMC, и
экспериментально показано на глазах доноров
MMC легко проникает в склеру, и орошение уменьшает
концентрация только в поверхностных слоях17. Далее показано
что во время трабекулэктомии в глазах человека диффузия
MMC для более глубоких слоев продолжается даже после окончания
воздействие пропитанной губки18. Эти эксперименты
показывают, что после 1 мин применения 0,2 мг / мл MMC,
максимальные концентрации на внутренней стороне склеры могут
достигают 0,01-2 мкг / мл в зависимости от продолжительности воздействия.18
Jampel показал, что MMC при применении в концентрации
0,4 мг / мл в течение 5 мин почти полностью останавливает
пролиферация культивируемых фибробластов человека (90% ингибирование) .16
Морфологическое доказательство токсических эффектов MMC на непигментированных
эпителия цилиарного тела после эписклерального применения7,19 предполагают роль цилиарной гипосекции в качестве причины стойких
гипотония.

Настоящее исследование убедительно продемонстрировало, что MMC
проникает в эпителий конъюнктивы и находится в
средняя концентрация 18,67 ± 32,36 × 10-6 моль / кг
ткани (диапазон: 0,38-197,05 × 10-6) в ткани Тенина. Это было
экспериментально показано (in vitro), что концентрация MMC
2 x 10-6 M (моль / литр) требуется для ингибирования пролиферации
фибробласты. В нашем исследовании концентрация выше, чем указано выше
упомянутый был оценен у 36 из 41 пациента (87,80%)
в которой MMC была применена по неповрежденной конъюнктиве.
Кроме того, применение сверхконъюнктива может уменьшить
количество диффузии лекарственного средства через склеру в виде
препарат наносят на конъюнктиву, и существуют барьеры
конъюнктивы и капсулы Тенона в дополнение к склере,
тем самым снижая вероятность токсичности цилиарного эпителия
проявляющиеся как длительная гипотония и другие осложнения.
Концентрация представлена ​​в молях / кг ткани, поскольку
оценка содержания воды в таком небольшом количестве человека
ткани не было возможно для молярного расчета для каждого и
каждый образец.

Послеоперационное использование MMC в виде капель (0,3 мг / мл)
было показано, что оно является эффективным с точки зрения прекращения и реверсии
ранний субконъюнктивальный фиброз.6 Роговичная эпителиальная токсичность,
однако, было замечено с использованием актуальных капель.

В исследовании, проведенном Mietz et al., Послеоперационное поверхностное применение
по сравнению с интраоперационным применением MMC.
Было обнаружено, что гипотония как явление переходного процесса
произошло в 36% случаев в группе послеоперационного применения
по сравнению с 77% случаев во внутриоперационном применении
группа. Средний ВП при последнем посещении составлял 16,0 ± 2,7 (9-20) в
послеоперационной группы приложений и 12,5 ± 7,1 (4-32) в
интраоперационная группа приложений. Ни один из случаев в
послеоперационная группа сообщила о глазном дискомфорте или роговице
эрозий. В нашем исследовании временная гипотония, требующая AC
реформация или ревизия пузыря отмечена в 5 из 41 (12,20
%) случаев, нет случаев утечки пузырька, тонкого пузыря, стойкой гипотонии,
хориоидальная отслойка, гипотоническая макулопатия или роговица
эпителиальная токсичность была замечена в непосредственной послеоперационной
период.

Хорошо доказано, что антиметаболиты при использовании с
пересмотр иглы усиливает успех неудачных пузырей.20
Во время этих процедур субконъюнктивальная инъекция 5 FU
приведены в области пузырьков. Ознакомившись с ранними признаками
дефекты пузырьков, такие как инъекция пузыря, васкуляризация пузырьков или
большие сосуды для ловли 21 над областью пузырьков, может применяться MMC
supraconjunctivally. Наше исследование показывает, что MMC свободно
проникает в конъюнктиву и, вероятно, будет препятствовать
пролиферация фибробластов под ним. Supraconjunctival
применение MMC может обеспечить менее инвазивную альтернативу
к субконъюнктивальному применению, особенно при использовании вдоль
с ревизией пузыря. Мы считаем, что в случаях,
признаки пропадающего пузыря, 21 можно выбрать послеоперационную поверхность
применение MMC.11

В нашем исследовании было большое изменение в количестве
собранной ткани и достигнута концентрация MMC
в ткани Тенона; однако в большинстве случаев (80,80%),
концентрация MMC достигала 2 x 10-6 молей / кг
ткани. Несмотря на ограниченность исследования,
не была стандартизация количества ткани, вырезанной для
анализ и только одна концентрация 0,4 мг / мл для
фиксированная длительность времени (3 мин), количественная
информация о трансконъюнктивальном проникновении сверхконъюнктивальной MMC понятна.

Это экспериментальное исследование убедительно доказывает, что значительные
концентрации MMC могут быть достигнуты одним
супраконъюнктивальное применение 0,4 мг / мл. Этот режим
применение может быть менее инвазивным и теоретически более безопасным
альтернатива субконъюнктивному применению MMC, особенно
для возрождения неисправного пузыря и обеспечения эффективного проникновения
антиметаболита на требуемом участке.

Презентация на совещании: Организация: SEAGIG; Место: Ченнай; Дата:
1-3 декабря 2006 г.

Источник поддержки: Nil

Конфликт интересов: не объявлено

Хроматограмма образца ткани пациента, показывающая митомицин С (пик элюирования при времени удерживания 6,52 мин)

Распределение возраста пациентов, включенных в исследование

Возраст против среднего веса ткани Тенона

Вес (средний ± SD) ткани Тенона и концентрация (в среднем ± SD) митомицина C (MMC)
по оценкам

Комментариев нет.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *