Нажмите "Enter", чтобы перейти к контенту

Сравнение воспалительных маркеров в индуцированной и спонтанной мокроте в когорте пациентов с ХОБЛ

Comparison of inflammatory markers in induced and spontaneous sputum in a cohort of COPD patients
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4237726/

Индукция мокроты является неинвазивным методом для получения измерений воспаления в дыхательных путях. Неизвестно, может ли самопроизвольно сэмплированная мокрота быть действительным суррогатом. Целью этого исследования было сравнить уровни шести воспалительных маркеров в парах мокроты, состоящих из индуцированной и спонтанной мокроты, отобранной на одной и той же консультации либо в стабильном состоянии, либо во время обострений хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ).

433 пациентов с ХОБЛ в возрасте 40-76 лет, Глобальная инициатива по хроническому обструктивному заболеванию легких (ЗОЛОТ) II-IV была включена в 2006/07 г. и каждые шесть месяцев проводилась в течение трех лет. За потенциальными обострениями наблюдалось 356 пациентов. Интерлейкин-6, интерлейкин-8, интерлейкин-18, интерферон-гамма-индуцируемый белок-10, монокин, индуцированный гамма-интерфероном и фактором некроза опухоли-альфа (IL-6, IL-8, IL-18, IP-10, MIG и TNF-α) измеряли мультиплексным иммуноанализом на основе шариков в 60 парных образцах мокроты у 45 пациентов. Альбумин измеряли ферментным иммуноанализом для коррекции концентрации. Культивирование для роста бактерий проводилось на 24 образцах. Для оценки соглашения использовались участки Бланда-Альтмана. Для статистического анализа использовался парный непараметрический тест подписи под знаком Уилкоксона, непараметрический критерий корреляции Спирмена и критерий Крускала-Уоллиса. Для всех анализов значение p <0,05 считалось значимым.

Соглашение между этими двумя измерениями, как правило, было низким для всех шести маркеров. TNF-α был значительно выше в спонтанной мокроте при обострениях (p = 0,002) и выше в установившемся состоянии (p = 0,06). Коэффициенты корреляции между уровнями маркеров в индуцированной и спонтанной мокроте варьировались от 0,58 (IL-18) до 0,83 (IP-10). В спонтанной мокроте IL-18 и MIG были выше у бывших курильщиков (р <0,05). Уровни всех маркеров были выше на стадии III и IV GOLD, за исключением IL-6 в спонтанной мокроте и IL-18 в индуцированной мокроте, по сравнению со стадией GOLD II, хотя и не статистически значимыми. В спонтанной мокроте уровни IL-6 были значительно выше, если Haemophilus influenzae (HI) не культивировалось.

Мы наблюдали низкое согласие и существенные различия в воспалительных маркерах между индуцированной и спонтанной мокротой как в стационарном состоянии, так и в обострениях. Мы рекомендуем рассмотреть метод отбора проб при сообщении о воспалительных маркерах в мокроте.

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) является хроническим воспалительным заболеванием, влияющим как на дыхательные пути, так и на паренхиму легких [1]. Повышенное воспаление дыхательных путей было хорошо описано, но его роль все еще противоречива [2]. Получение надежных измерений воспаления дыхательных путей неинвазивно может позволить проведение крупных когортных исследований. Недавно были сопоставлены биомаркеры, отобранные методами, такими как конденсат выдыхаемого воздуха и индуцированная мокрота [3]. Индуцированная выборка мокроты (ISS) является неинвазивной процедурой, которая была стандартизирована и широко использовалась за последние 20 лет [4]. Небулайзированный и вдыхаемый физиологический раствор увеличивает выработку мокроты в легких [4]. Сообщалось, что индукция дает образцы мокроты достаточного качества для анализа более чем у 80% пациентов с астмой и ХОБЛ [5-8]. У пациентов с обструктивным легочным заболеванием МКС обычно проводится в стационарном состоянии, так как это может вызвать бронхоконстрикцию [9,10]. Однако, по крайней мере, одно исследование показало, что это можно сделать безопасно также во время обострений у пациентов с легкой и умеренной ХОБЛ [11].

Альтернативой МКС является спонтанная выборка мокроты (SSS). Уровни воспалительных маркеров и количества клеток в спонтанной и индуцированной мокроте были представлены без различия между двумя методами отбора проб в некоторых исследованиях [12-14]. Два исследования показали, что жизнеспособность клеток была выше у индуцированной, чем спонтанной мокроты у пациентов с астмой или ХОБЛ [15,16]. Тем не менее, в немногих исследованиях рассматривается вопрос о том, может ли наведенная и спонтанная мокрота, взятая у пациентов с ХОБЛ, взаимозаменяемо для анализа воспалительных маркеров, как это указывалось в обзорной статье, опубликованной еще в 2013 году [17]. Больше исследований по этому вопросу было рекомендовано уже в 2002 году [4].

Целью этого исследования было сравнить уровни шести общих воспалительных маркеров интерлейкина 6, 8 и 18 (IL-6, IL-8 IL-18), индуцируемого гамма-индуцируемым белком-10 (IP-10) интерферона, некроза опухолей фактор-альфа (TNF-α) и монокин, индуцированный гамма-интерфероном (MIG), в парных индуцированных и спонтанных образцах мокроты, собранных у пациентов с ХОБЛ в стабильном состоянии и / или при острых обострениях. Эти маркеры были выбраны для различных ролей в воспалениях дыхательных путей при ХОБЛ, как часть анализов в исследовании Бергена по изучению ХОБЛ. Кроме того, это исследование позволило оценить безопасность индукции мокроты у пациентов с ХОБЛ, подвергающихся обострению.

Когортное исследование Бергенской ХОБЛ (BCCS) было трехлетним наблюдением 433 пациентов с ХОБЛ из Западной Норвегии в период с 2006 по 2010 год, ранее подробно описанных [18]. Пациентов приглашали в наш учебный центр каждые шесть месяцев, и индукция мокроты выполнялась почти во всех посещениях. Из 433 пациентов с ХОБЛ 356 пациентов, живущих в непосредственной близости, что означало, что они принадлежали к больничному району Бергена, были предложены совместное участие в исследовании Бергена по изучению ХОБЛ (BCES). Пациентам, включенным в BCES, была дана ламинированная зеленая карта с подробными инструкциями относительно потенциальных симптомов обострения ХОБЛ и номера телефона для нашей медсестры. Телефон был открыт 12 часов в день, семь дней в неделю в течение трех лет, в течение которых проводилось исследование. После того, как контакт был сделан, медсестра исследования определила, нужна ли немедленная госпитализация, или можно ли назначить визит с врачом-исследователем в следующий рабочий день. Во время этого визита или в палате на следующий день после госпитализации индукция мокроты была предпринята, если наш врач-медик определил это событие как клиническое обострение ХОБЛ с официальной оценкой в ​​соответствии с определением Ведзича и Доналдонса [19].

Образцы спонтанной мокроты собирали перед наложением образца мокроты в то же время в случаях, когда пациенты получали изобильную мокроту. Всего для анализа было доступно 60 пар мокроты приемлемого качества у 45 пациентов в стабильном состоянии (n = 31) или во время обострения ХОБЛ (n = 29). Классификация в Глобальную инициативу по хроническому обструктивному заболеванию легких (GOLD 2007) и информацию о привычках к курению были основаны на базовом посещении в BCCS. Все пациенты предоставили письменное информированное согласие, и оба исследования были одобрены Норвежским региональным этическим комитетом.

Индукции проводили с использованием ультразвукового волнового распылителя. Гипертонический солевой раствор (3%) вдыхали семь минут раз три, а мокроту пытали пробы после каждого вдоха. Если, однако, пациент был оценен врачом-исследователем как слишком клинически обструктивный, или если пациент не захотел вдыхать повышенную концентрацию солевого раствора, вместо этого вдыхали физиологическую концентрацию 0,9%. Из 60 оцениваемых пар мокроты индукцию проводили с 3% физиологическим раствором в 47 случаях, 0,9% в десяти случаях, тогда как для трех индукций концентрация не регистрировалась. Спирометрические оценки (Vitalograph S-model Vitalograph Ltd., Букингем, Англия при регулярных визитах в устойчивое состояние, модель EasyOne 2001 Ndd Medizintechnik AG, Цюрих, Швейцария при обострениях) были выполнены после ингаляции 200-400 мкг сальбутамола до индукции с физиологический раствор. Спирометрию затем повторяли после каждого вдыхания физиологического раствора. Процедура завершилась, если FEV1 снизился на 20% и более, если симптомы больного ухудшились или если пациент не захотел действовать. Если насыщение кислородом после бронходилататора было <90%, индукция не проводилась.

Для SSS пациентов просили отхаркивать в двух разных чашках и обрабатывали наиболее гнойную мокроту. Оба типа образцов мокроты хранятся на льду до тех пор, пока они не будут обработаны для контроля качества и хранения, как правило, в течение 30 минут. Для разрушения дисульфидных связей в муцине добавили 4 мл дитиотреитола 0,1% (ДДТ) на грамм мокроты [20]. Затем образцы гомогенизировали, используя гомогенизатор Эппендорфа при 600 об / мин в течение 15 минут при температуре 4 градуса Цельсия. Добавляли забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS) и образец фильтровали для увеличения гомогенизации. Супернатанты удаляли после 15-минутного центрифугирования при 4 градусах Цельсия, 450 г, высушивали в 0,5 мл пробирках и хранили при -80 ° С. Обученный персонал оценивал жизнеспособность после окрашивания триптан-синим. Для того чтобы образцы мокроты считались приемлемыми, необходимо было> 1 миллион / мл клеток, <20% эпителиальных клеток и жизнеспособность лейкоцитов должны были быть> 30%. После декабря 2006 года все образцы мокроты были также культивированы на кафедре микробиологии больницы Университета Хауканд.

Образцы мокроты анализировали на цитокины с использованием технологии Luminex® xMAP® (Luminex Corporation, Austin, Texas). Использовали анализ цитокинов, объединив стандарты из BioRad (Bio-Plex Pro Human Cytokine Standards Group I 27-Plex № 171-D50001, Lot No 5022130. Bio-Plex Pro. Цитокиновые цитокины группы II II группы 23-Plex # 171-D10502 Lot No 5015357) и одноплексные анализы, содержащие шарики для анализа IL-6, IL-8 IL-18, IP-10, TNF- и MIG. Таким образом, все шесть маркеров были проанализированы в симплексном режиме. Образцы были обработаны на приборе Luminex 100, а результаты собраны и сохранены с помощью программного обеспечения STARStation версии 2.0 (STARStation Software Version 2.0, Applied Cytometry, Sheffield, UK). Процедура выполнялась в соответствии с инструкциями производителя в течение шести отдельных дней в сентябре 2011 года ,

Для 58 из 60 пар мокроты у нас также было достаточно материала для проведения иммуноферментного анализа уровней альбумина в дуплексе (альбумин человека ELISA kit, ab 108788, Abcam, Cambridge, UK). Альбумин использовался в качестве поправочного коэффициента для концентрационных различий между индуцированным и спонтанным образцом для каждой пары следующим образом: Отношение индуцированного к спонтанному альбумину было рассчитано для каждой пары мокроты, а уровень каждого из шести маркеров в каждом из образцы спонтанной мокроты, умноженные на соответствующее соотношение. Все последующие статистические анализы выполнялись как на «скорректированных» уровнях мокроты, так и на «нескорректированных» уровнях мокроты.

Stata 12.0 использовался для статистического анализа (StataCorp. College Station, Texas). Были сделаны расчеты Бланда-Альтмана для оценки согласия между измеренными уровнями маркеров в индуцированных и спонтанных парах мокроты. Блэнд и Альтман защищают использование разницы между двумя измерениями как центральное измерение смещения и распространение разницы как меру пределов соглашения [21]. Обычно разность между измерениями строится по среднему значению двух измерений с двумя стандартными отклонениями (SD) разницы, составляющей 95% -ные пределы согласия. Однако иногда разница зависит от величины среднего значения, в котором Bland & Altman выступает за построение графика в масштабе шкалы [22]. Это имело место для всех шести маркеров в нашем исследовании.

Воспалительные маркеры обычно не распределялись, поэтому для сравнения уровней маркеров и жизнеспособности клеток между спонтанной и индуцированной мокротой использовался парный непараметрический тест подписи под знаком Wilcoxon. Для корреляционного анализа между спонтанными и индуцированными образцами использовался непараметрический критерий ранговой корреляции Спирмена. Для сравнения уровней воспалительных маркеров по клиническим характеристикам использовался критерий Крускала-Уоллиса. Для сравнения снижения FEV1 между стабильным состоянием и обострениями во время индукции использовался критерий подписи под знаком Wilcoxon. Для всех анализов считалось значительным значение p менее 0,05.

Характеристики исследуемой популяции представлены в таблице 1. 60 пар мокроты были доступны у 45 пациентов, из которых 15 пациентов были женщинами. Из 60 пар мокроты 31 были отобраны во время стабильного состояния и 29 во время обострений ХОБЛ (таблица 1). Таблица 1
Характеристики исследуемой популяции

* При включении.

** Состоит из одного спонтанного и одного индуцированного образца мокроты.

† Обнаружено в индуцированной и / или спонтанной мокроте, отбираемой из постоянных посещений состояния и / или обострений.

Средняя жизнеспособность клеток составляла 98% как для индуцированных, так и для спонтанных образцов мокроты. Среди индуцированных образцов 2 из 60 образцов имели жизнеспособность ниже 90%, поскольку спонтанные образцы были на 90% жизнеспособными или лучше.

Из шести воспалительных маркеров TNF-α был значительно выше при измерении спонтанной мокроты во время обострений и почти достигал статистической значимости в установившемся состоянии (таблица 2). Для других маркеров не было видно четкой тенденции (Таблица 2). Таблица 2
Сравнение воспалительных маркеров в индуцированной и спонтанной мокроте, отобранной у пациентов с ХОБЛ в то время; либо во время обострения ХОБЛ, либо во время стабильного состояния

* Уиткоксон знак ранга тест.

Графики Bland-Altman для всех шести воспалительных маркеров на шкале логарифма представлены на рисунке 1. Чтобы получить пределы согласия, был рассчитан антилог двух стандартных отклонений, которые представлены в таблице 3 вместе с коэффициентами ранговой корреляции Спирмена. Хотя корреляция была справедливой, варьируя от 0,58 для IL-18 до 0,83 для IP-10, соглашение было довольно низким для всех шести воспалительных маркеров. Поскольку 95% -ные пределы соглашения были рассчитаны по шкале логарифмов, верхний и нижний пределы представляют отношения относительно единицы. Таким образом, исходя из расчетов, представленных в Таблице 3, можно было бы ожидать, что измерение, например, IL-6 в спонтанной мокроте, упадет в 6 раз выше или в 8 раз ниже, чем измеренное в индуцированной мокроте 95% времени.
Бланд-Альтман заключает соглашение между измерениями шести воспалительных маркеров в индуцированных и спонтанных образцах мокроты.

Ранговые коэффициенты корреляции и 95% -ные пределы согласия между измерениями шести воспалительных маркеров в индуцированных и спонтанных образцах мокроты

* Тест корреляции рангов Спирмена.

† ± 2 SD средней разницы между двумя измерениями.

Несмотря на то, что согласие между отдельными измерениями было низким, может быть значение для спонтанных образцов, если уровни маркеров показали те же самые ассоциации с клиническими параметрами как спонтанные, как в индуцированных образцах мокроты. Потенциальные ассоциации между измеренными уровнями воспалительных маркеров в спонтанных и индуцированных образцах и клинические переменные представлены в таблице 4. Не было постоянной разницы в уровнях любого из шести маркеров между текущими и бывшими курильщиками. Однако в спонтанных образцах измеренные уровни IL-18 и MIG были значительно выше у бывших курильщиков, ассоциация, не обнаруженная в индуцированных образцах. Для всех маркеров, кроме ИЛ-6 и ИЛ-18, на III-IV ступени III и IV уровня GOLD наблюдалась незначительная тенденция к более высоким уровням по сравнению с стадией ЗОЛОТО II. Важно отметить, что картина была одинаковой как для спонтанных, так и для индуцированных образцов мокроты. Наконец, в 24 парах мокроты, где была получена культура, мы исследовали, какое воздействие на Haemophilus influenzae (HI) было на образце мокроты. В спонтанных образцах HI ассоциировался со значительно более низкими уровнями IL-6, разница не была обнаружена в индуцированных образцах. Кроме того, мы обнаружили, что в спонтанных образцах уровни MIG были ниже в мокроте с HI, тогда как противоположная картина наблюдалась в индуцированных образцах (таблица 4). Таблица 4
Значения медианы (IQR) воспалительных маркеров в индуцированных и спонтанных образцах мокроты путем курения, стадии GOLD и состояния носителя H. influenzae

* Тест Крускала-Уоллиса.

Для оценки безопасности индукции во время обострений и стабильного состояния мы рассчитали снижение FEV1%, предсказанного во время индукции для всех пациентов с ХОБЛ, которые подверглись индукции как в BCCS, так и в BCES. Для снижения FEV1%, предсказанного по значениям пост-бронходилатации при индукции, рассчитывалось относительное падение (таким образом, снижение с 30%, предсказанное до прогнозируемого 20%, будет представлено как снижение на 33%). Чтобы избежать повторных измерений у одного и того же пациента в стационарном состоянии и / или при обострениях, только одна зарегистрированная индукция в двух разных болезненных состояниях была выбрана для анализа на одного пациента. 63 пациента были вызваны во время обострения. 33 пациента были ЗОЛОТОЙ этап III или IV, тогда как остальные 30 были стадией ЗОЛОТО II. Мы не обнаружили существенной разницы в прогнозируемом снижении ОФВ1%, вызванном индукцией, связанной с тяжести заболевания (р = 0,07) во время обострений. При сравнении групп пациентов в стабильном состоянии мы обнаружили, что пациенты с более тяжелой ХОБЛ имели статистически большее снижение, связанное с индукцией, чем пациенты с стадией II ХОБЛ ЗОЛОТО (р <0,001). Относительное падение было значительно выше в стабильном состоянии, чем при обострениях (p = 0,03) (таблица 5). Однако никаких побочных эффектов не наблюдалось, несмотря на состояние заболевания и тяжесть, и все пациенты увеличивались в ОФВ1 после периода отдыха и новой ингаляции сальбутамола. Таблица 5 Относительная ОФВ 1 снижение в%, предсказанное во время индукции мокроты

* Уиткоксон знак ранга тест.

Это исследование показало, что для шести воспалительных маркеров корреляция между уровнями, измеренными на индуцированных и спонтанных парах мокроты, была справедливой, но соглашение было довольно низким. TNF-α был значительно выше в спонтанных образцах мокроты, чем в индуцированных образцах при измерении во время обострения ХОБЛ. Кроме того, существует связь между состоянием HI-носителя и IL-6, а также статусом курения и IL-18 и MIG, обнаруженным только в спонтанных образцах мокроты.

Есть некоторые методологические вопросы, которые следует учитывать. Во-первых, было показано, что как PBS, так и DTT влияют на восстановление некоторых цитокинов [12,23]. Тем не менее, сила этого исследования заключалась в том, что для всех пар мокроты использовался тот же самый протокол обработки, что, таким образом, не влияло бы на измеренные уровни по-разному между спонтанными и индуцированными образцами мокроты. Во-вторых, все воспалительные маркеры были измерены в симплексе, поэтому потенциальная ошибка измерения больше, чем при измерении маркеров в дуплексном режиме. Выбор анализа в симплексе был обусловлен затратами, поскольку это часть более широкого анализа воспалительных маркеров в мокроте. Самое главное, однако, все пары мокроты анализировались на одной и той же пластинке в тот же день. Таким образом, погрешность измерения не должна различаться между спонтанными и индуцированными образцами. В-третьих, мы обнаружили ассоциации между воспалительными маркерами и курением, а также воспалительные маркеры и колонизацию HI только в спонтанной мокроте. Мы не обнаружили никакой связи между воспалительными маркерами и стадией GOLD в любом типе мокроты, но это может быть из-за отсутствия силы. Наконец, выбор того, следует ли индуцировать или нет во время обострения, был основан на нескольких субъективных факторах в дополнение к насыщению кислородом; самое главное — готовность пациентов к индуцированию и оценка клиницистами обструктивности. Таким образом, из этого проекта невозможно сделать вывод о том, что индукция мокроты будет безопасной во время всех обострений.

Хотя больше исследований по вопросу о том, можно ли сравнивать спонтанные и индуцированные образцы мокроты, было рекомендовано уже в 2002 году [4], пока еще не опубликовано несколько исследований. Мы обнаружили один более ранний отчет об уровнях IL-8 в спонтанной и индуцированной мокроте, который не обнаружил существенных различий в уровнях IL-8 между двумя типами мокроты у пациентов с ХОБЛ в стабильном состоянии [16]. Наше исследование подтвердило результаты этого раннего исследования, но, кроме того, мы смогли показать, что это верно и во время обострения. Мы не смогли найти более ранние сообщения о соотношении уровней воспалительных маркеров в спонтанной и индуцированной мокроте для оставшихся пяти воспалительных маркеров. По нашим сведениям, сравнение других воспалительных маркеров в индуцированной и спонтанной мокроте, отобранной на одной и той же консультации, не проводилось у пациентов с обструктивной болезнью легких.

Ранее было показано, что мокрота, пробоотборная на ранней стадии индукции, имеет различную консистенцию и состав клеток, чем мокрота, отобранная в конце индукции [24, 25]. Вероятно, что более центральные дыхательные пути отбираются на ранней стадии и, таким образом, наиболее напоминают спонтанную мокроту. Таким образом, индуцированная мокрота, вероятно, будет пробовать более дистальную среду дыхательных путей, чем спонтанная мокрота. Центральные и дистальные дыхательные пути отличаются эпителиальными компонентами [26], распределением иммунных клеток [27,28] и, возможно, респираторным микробиомом [29]. Таким образом, теоретически весьма вероятно, что уровни воспалительных маркеров различаются между спонтанными и индуцированными образцами мокроты. Однако можно утверждать, что спонтанная мокрота может быть благоприятной альтернативой индуцированной мокроте, когда пациенты находят индукцию неудобной или безопасность индукции является неопределенной, и позволяют проводить выборку в первичных медицинских учреждениях, где индукция редко бывает когда-либо выполняемой по нашим знаниям. Показано, что жизнеспособность клеток в спонтанной мокроте в некоторых исследованиях была хуже, чем при индуцированных образцах мокроты [15,16]. Такого не было в наших образцах, где жизнеспособность была столь же хороша в спонтанных образцах, что и в индуцированных образцах. В нашем исследовании время от сбора до обработки обычно было очень коротким, что могло бы объяснить высокую жизнеспособность.

Хотя согласие для индивидуальных измерений было низким, измерение уровней воспалительных маркеров в спонтанной мокроте могло иметь значение, например, при серийных измерениях спонтанной мокроты, что наше исследование не имеет возможности оценить. Кроме того, хотя сопоставление воспалительных маркеров между спонтанной и индуцированной мокротой недействительно для некоторых маркеров, они могут быть действительными для других.

Имеются все еще редкие данные о безопасности при индукции у пациентов с тяжелой ХОБЛ во время обострений, а в нескольких исследованиях индукция мокроты проводится во время обострения без опубликованной отчетности о потенциальных неблагоприятных последствиях для процедуры [3,30,31].

В нашем исследовании мы обнаружили статистические различия в прогнозируемом снижении FEV1% у пациентов с умеренной и тяжелой / очень тяжелой ХОБЛ только во время стационарного состояния, тогда как тяжесть заболевания не влияла на снижение во время обострений. Никакие побочные явления не регистрировались ни в стационарном состоянии, ни при обострениях. Это соответствует другим отчетам [7,11], но мы расширяем их, включив пациентов с тяжелой / очень тяжелой ХОБЛ. Однако следует подчеркнуть, что необходимо принять необходимые меры предосторожности, такие как доступ к острым лекарственным средствам для спасения, и что все индукции должны проводиться только обученным медицинским персоналом [32].

Результаты текущего исследования указывают на необходимость представления отчетности о методах отбора проб при рассмотрении воспалительных маркеров в образцах мокроты, собранных у пациентов с ХОБЛ, как в течение стационарного состояния, так и при острых обострениях, поскольку соглашение было в целом низким, что оценивалось по 95% -му пределу Блэна и Альтмана соглашения. Можно ли сравнивать уровни воспалительных маркеров между спонтанными и индуцированными образцами мокроты, которые могут различаться по каждому воспалительному маркеру, и должны быть рассмотрены в каждом исследовании. В тех случаях, когда индуцированная выборка мокроты невозможна, спонтанные образцы могут иметь значение по сравнению с другими спонтанными образцами.

Изучение когорты

Исследование обострения ХОБЛ в Бергене

Хроническое обструктивное заболевание легких

дитиотреитол

Глобальная инициатива по хронической обструктивной болезни легких

Гемофильный грипп

Интерлейкин 6

Интерлейкин 8

Интерлейкин 18

Интерферон-гамма-индуцибельный белок-10; MIG, монокин, индуцированный гамма-интерфероном

Индуцированная выборка мокроты

Фосфатно-буферный раствор

Спонтанная выборка мокроты

Фактор некроза опухоли-альфа

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Вклад авторов

Концепция исследования и дизайн: ST, TME, MA, PSB. Приобретение данных: ST, MA, LJPP, PSB, TME. Анализ и интерпретация данных: ST, MA, KAB, TME. Составление рукописи: ST, TME. Критический пересмотр рукописи для важного интеллектуального контента: MA, LJPP, KAB, PSB. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Авторы два благодарственное исследования медсестра Margrete Klemmetsby, физиотерапевт Мари Waatevik, микробиолог Даг Harald Skutlaberg, биоинженер Лене Свендсен и Тина Эндресен-Vinsjevik за неоценимую поддержку во время сбора данных, и Rune Grønseth помощи с Бленд Альтман анализа.

Комментариев нет.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *