Нажмите "Enter", чтобы перейти к контенту

Вирус Myxoma нацеливает первичные лейкозные лейкозные клетки человека и клетки-предшественники, сохраняя нормальные гемопоэтические стволовые клетки и клетки-предшественники

Myxoma Virus Targets Primary Human Leukemic Stem and Progenitor Cells While Sparing Normal Hematopoietic Stem and Progenitor Cells
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3277946/

Авторы внесли одинаковый вклад

Соавторы

(A) Обычные и лейкозные клетки (FLT ITD +) инкубировали с MYXV, экспрессирующим GFP при 10 МВ. Проточный цитометрический анализ показал, что небольшая популяция нормальных МНК была заражена, в то время как значительная часть клеток AML была восприимчива к инфекции MYXV. (B) Анализ апоптотических событий был исследован и показал, что гибель клеток наблюдалась в основном в популяции клеток, инфицированных GFP + MYXV, как показано окрашиванием в Приложении V. Все стробирования были установлены с использованием соответствующих элементов управления изотипами. (C, D). Нормальные BM-клетки инкубировали с MYXV, экспрессирующим GFP при 10 МВи и оценивали для потенциала формирования колоний. Были образованы различные типы колоний ХФУ и не проявлялась никакой экспрессии GFP в обработанных MYXV (D) или обработанных образцами образцах (C), что указывает на то, что MYXV не смог заразить нормальные ХФУ. (E) Частота каждого типа колонии была перечислина после MYXV или макетирования. Аналогичные частоты наблюдались между обеими когортами, предполагающими, что MYXV не препятствует нормальной дифференциации колоний CFC in vitro. Данные являются репрезентативными для повторных экспериментов, а значения представляют среднее ± стандартное отклонение. (F) Образованные обработанные AML-клетки формируют колонии AML-CFU. (G) Клетки AML, обработанные MYXV, проявляли признаки инфекции (GFP +) и не образовывали колонии.

(A). Нормальные BMN-производные MNC или CD34 + отобранные клетки подвергали воздействию MYXV при 10 МОИ в течение 3 часов ex vivo и трансплантировали облученным мышам NOG. Анализ мышиного BM через 6-8 недель демонстрировал нормальное сцепление клеток человека с клетками CD45 + / HLA-abc +, наблюдаемыми как в обработанных MYXV (n = 9), так и в обработанных (n = 10) группах. Показаны репрезентативные диаграммы проточной цитометрии. (B) Аналогичные частоты приживления наблюдались между ложными и обработанными MYXV клетками. Как и ожидалось, процентные значения приживления варьировались между мышами; однако общие уровни приживления были сходными между мышами, получавшими макет или обработанные MYXV клетки (p = 0,41). Символы, представляющие мышей, трансплантированных MNC или CD34 + клетками, показаны в открытых и заполненных формах (круг: Mock обработанный, квадрат: MYXV продублирован) соответственно. (C) Клетки AML обрабатывали или подвергали воздействию MYXV при 10 МОИ в течение 3 часов ex vivo и затем трансплантировали облученным мышам NOG. Мак-обработанные клетки AML продемонстрировали лейкемическое приживление у всех тестируемых мышей (n = 7). Обработанные MYXV клетки AML приводили к лейкемическому приживлению только у 10% трансплантированных мышей, которые анализировали с помощью проточной цитометрии (n = 10). Показаны репрезентативные диаграммы проточной цитометрии. (D) Приживление лейкемией также было продемонстрировано с использованием ПЦР для мутации FLT3 ITD. Лейкемические человеческие клетки в костном мозге мыши продемонстрировали генотип AML FLT3 ITD. Мутация FLT3 ITD в клетках AML создавала большую полосу FLT3 по сравнению с обычными элементами управления. Показаны только привитые образцы: один представитель 7 из ложно обработанного и единственный FACS-положительный привитый образец от 10 мышей с продувкой MYXV. В качестве контроля ПЦР использовали нормальные клетки BM и AMN MNC. (E) Обработка MYXV приводила к значительно более низким процентным уровням приживления по сравнению с контрольными контрольными методами (p <0,05). Значения представляют среднее значение ± SEM. Gating был установлен с использованием соответствующих изотипных элементов управления.

Комментариев нет.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *