Нажмите "Enter", чтобы перейти к контенту

Матричные металлопротеиназы при туберкулезно-иммунитетном воспалительном синдроме и нарушенной функции легких среди продвинутых ВИЧ-инфицированных пациентов, инициирующих антиретровирусную терапию

Matrix Metalloproteinases in Tuberculosis-Immune Reconstitution Inflammatory Syndrome and Impaired Lung Function Among Advanced HIV/TB Co-infected Patients Initiating Antiretroviral Therapy
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4793443/

ВИЧ-инфицированные пациенты с туберкулезом легких (pTB) могут иметь
ухудшение респираторных симптомов как часть воссоздания туберкулеза
воспалительный синдром (ТБ-ИРИС) после антиретровирусной терапии (АРТ)
инициация. Таким образом, восстановление иммунной функции при АРТ могло привести к инциденту
повреждение легких при ВИЧ / ТБ.

Мы предположили, что увеличение матрицы
металлопротеиназы (ММР), которые могут деградировать матрицу легкого, на АРТ
с ТБ-ИРИС среди когорты продвинутых, АРТ наивных, ВИЧ-инфицированных взрослых с
РТВ. Кроме того, мы говорили о ранних изменениях иммунных мер и ММР в отношении АРТ
легочной функции в исследуемом подмножестве пациентов после туберкулезного лечения. Это исследование было
вложенные в проспективное когортное исследование. Ранжирование суммы и хи-квадрат тестов,
Коэффициент корреляции Спирмена и логистическая регрессия были использованы для
анализы.

Увеличение MMP-8 после начала АРТ было
независимо от TB-IRIS (p = 0,04, скорректированное отношение шансов 1,5 [95% доверительный интервал: 1,0-2,1], n = 32). Увеличение количества CD4 и MMP-8 на АРТ
также были связаны с сокращением объема принудительного выдоха за одну секунду после туберкулеза
(r = — 0,7, p = 0,006 и r = 0,6, p = 0,02 соответственно, n = 14).

Увеличение, вызванное АРТ, связано с TB-IRIS
и может повлиять на лечение после туберкулеза легких. Ущерб от повреждений органов перед ТБ-ИРИС и
механизмы, при которых восстановление иммунной системы нарушает функцию легких в pTB
дальнейшее расследование.


              Матричные металлопротеиназы (MMP), способные
деградирующий коллаген легких, может быстро увеличиваться при АРТ при ВИЧ / ТБ
пациентов.

Увеличение концентрации MMP-8 в плазме после АРТ
инициация связаны с развитием парадоксальных
TB-IRIS.

Увеличение концентрации Т-клеток CD4 и концентрации MMP-8
после начала АРТ коррелируют со сниженной функцией легких
после туберкулезного лечения.

Заболевания, связанные с туберкулезом, могут сохраняться после туберкулеза
излечение. Однако причинные механизмы повреждения легких, которые могут включать иммунные
механизмы и тканевые протеазы, в ТБ неясны. В этом отношении известно меньше
среди пациентов с ВИЧ / ТБ, которые подвергаются риску воспалительных реакций после
Инициирование АРТ, иначе известное как воспалительное воспаление ТБ-иммунного
синдрома (ИРИС). В этом исследовании быстрое увеличение АРТ в определенной ткани
деградирующие белки, называемые матриксными металлопротеиназами (ММР), были связаны с
TB-IRIS. Кроме того, быстрое восстановление Т-клеток CD4 и концентраций MMP-8
были связаны со сниженной функцией легких в исследуемом подмножестве. В
ВИЧ / ТБ, устойчивое увеличение клеточной иммунной функции и ММР на АРТ может
лежат в основе травм легких и долгосрочного легочного дефицита.

Для многих пациентов с ТБ заболеваемость заболевания распространяется
за пределами завершения лечения туберкулеза (Pasipanodya et al., 2010). Действительно, примерно половина
пациенты, пережившие туберкулез легких (pTB), наиболее распространенная форма заболевания,
страдают существенными долгосрочными нарушениями легких, несмотря на микробиологическое лечение
(Pasipanodya et al., 2010, Hnizdo et al., 2000, Ralph et al., 2013). Более того,
pTB, включая вылеченное заболевание, является основной причиной хронических заболеваний легких во всем мире
(van Zyl Smit et al.
2010).

Почти 15% всех случаев ТБ и 25% смертей от туберкулеза в мире
ВИЧ-ассоциированный
2014). Основные механизмы, приводящие к длительному легочному
заболеваемость после завершения лечения ТБ, особенно среди ВИЧ-инфицированных пациентов,
неясны (Pasipanodya et al., 2010, Hnizdo et al., 2000, Ralph et al., 2013).
Клинически нарушенная функция легких после завершения лечения туберкулеза
с большим рентгенологическим вмешательством легких при первоначальном представлении
(Plit et al., 1998).
Более высокое первичное рентгенологическое вовлечение легких также связано с более высоким уровнем CD4
считается у лиц с ВИЧ / ТБ (Kwan and Ernst, 2011, Post et al., 1995). Эти результаты согласуются с центральной ролью
клеточные иммунные ответы при образовании полостей и структурном повреждении легких в ТБ
(Flynn et al., 1993, Schluger et al., 2002). Механически матрица
металлопротеиназ (ММР), которые могут деградировать коллаген легких, также были
участвующих в TB-ассоциированной легочной ткани разрушения (Greenlee et al., 2007, Ong et al., 2014, Elkington et al., 2011). Однако более низкие концентрации ММР
и уменьшенное связанное с ТБ повреждение легких, оцениваемое рентгенографически, было
связанных с ВИЧ-инфекцией (Уокер
и другие. 2012). В совокупности эти данные показывают, что
пациенты с ВИЧ могут иметь меньшее вовлечение легких, чем те, у кого нет ВИЧ, но
данные, оценивающие эту связь, противоречивы (Hnizdo et al., 2000, Ralph et al., 2013).

Антиретровирусная терапия (АРТ) является критическим компонентом ВИЧ / ТБ
уход, приносящий преимущество выживания тем, кто начинает АРТ во время лечения
(Abdool Karim et al., 2011, Abdool Karim et al., 2010). Хотя использование АРТ в
ВИЧ-инфицированные пациенты независимо были связаны с обструкцией дыхательных путей
(George et al.
2009), ограничение исследований, связанных с ВИЧ-инфекцией легких при туберкулезе
заключается в том, что эффекты восстановления иммунитета клеток во время лечения ТБ не
были детально оценены. Быстрое восстановление клеточной иммунной системы в присутствии
высокая бремя антигенной антибиотики может достоверно способствовать формированию полости случайной полости и
ухудшение повреждения легких. В соответствии с этой гипотезой, отчеты о случаях
описанных пациентов с продвинутым ВИЧ / pTB и минимальным начальным рентгенологическим легочным
которые развивают массивные легочные инфильтраты, кавитацию легких и
бронхиолит облитерирующих вскоре после начала АРТ (Meintjes et al., 2008, Lawn et al., 2009). Повреждение легких во время восстановления иммунной системы при ВИЧ / ТБ
может также осложнить воспалительный синдром воспаления туберкулеза (TB-IRIS),
но эта гипотеза была относительно не исследована. В одном исследовании ВИЧ / ТБ
было обнаружено, что инфицированные взрослыми взрослые, которые испытали ТБ-ИРИС в отношении АРТ,
абсолютные концентрации ММР во время события IRIS по сравнению с
но функция легких не оценивалась (Tadokera et al., 2014).

В этом исследовании мы исследовали изменения концентрации ММР на
АРТ и связь между этими изменениями и парадоксальным ТБ-ИРИС в
хорошо охарактеризованная когорта ВИЧ-инфицированных взрослых с продвинутым ВИЧ / ТБ
(Ravimohan et al., 2013, Ravimohan et al., 2015a). Кроме того, в подмножестве
пациентов, мы исследовали взаимосвязь между величиной раннего иммунитета
восстановления и концентрации MMP на АРТ и легочной функции после туберкулеза
обработка завершение. Мы специально выбрали MMP-1, -2, -3, -8 и -9 для
анализ, поскольку они ранее были признаны связанными с легочной тканью
повреждение в ТБ (Elkington et al., 2011, Walker et al., 2012, Elkington et al., 2005, Elkington and Friedland, 2006, Ong et al., 2015).

Институциональные обзорные советы Университета
Пенсильвания, Министерство здравоохранения Ботсваны и больница Принцесса Марина
одобрил это исследование. Все пациенты предоставили письменное информированное согласие на
участвовать в этом исследовании.

Мы зарегистрировали наименее распространенных среди АРТ ВИЧ-инфицированных взрослых с туберкулезом легких
в проспективном когортном исследовании для изучения отношений между ранними
иммунного восстановления на АРТ и результатов лечения, как описано (Ravimohan et al., 2013, Ravimohan et al., 2015a). Ранее эта группа продемонстрировала, что
ранние изменения (измеренные в течение первых 4 недель АРТ)
в количествах CD4 и других иммунологических параметрах дифференциально связаны
со смертью и парадоксальным TB-IRIS (Ravimohan et al., 2015a). TB-IRIS в этой когорте
симптоматически характеризуется прежде всего ухудшением респираторного статуса
(Ravimohan et al.
2015a). Поэтому в этом вторичном анализе
предположил, что 1) концентрации ММР будут увеличиваться после АРТ
инициация и 2) ранние изменения в ММР будут связаны с парадоксальным
TB-IRIS. Наконец, в подгруппе пациентов мы исследовали гипотезу о том, что
быстрое увеличение количества CD4, Mycobacterium
туберкулез (MTB) — специфическая клеточная иммунная функция и
Концентрации ММР в начале после начала АРТ во время лечения ТБ, а также
как TB-IRIS в течение 6 месяцев после начала АРТ,
связанных с нарушением функции легких. Функция легких определялась месяцами
после завершения лечения ТБ, чтобы сосредоточиться на стабильных остаточных эффектах после туберкулеза
(Hnizdo et al.
2000).

Пациенты были включены в родительское исследование между
Ноябрь 2009 года и июль 2013 года из поликлиник и государственной третичной
в Габороне, Ботсвана, как описано (Ravimohan et al., 2013, Ravimohan et al., 2015a). Субъекты должны были иметь счетчик CD4 до АРТ
≤ 125 клеток / мкл и планируют инициировать
АРТ в течение 2 месяцев с начала стандартного лечения ТБ для
их недавно диагностированный туберкулез легких (Ravimohan et al., 2013, Ravimohan et al., 2015a). Учитывая наше внимание к возможным последствиям иммунной
восстановление по параметрам, связанным с легким, у тех, кто выживает из ТБ, для включения
в первичном анализе, касающемся концентраций ММР и ТБ-ИРИС, пациентов
требуемой базовой линии и 4-й недели после начала АРТ-измерения ММР и
необходимо было выжить до 6 месяцев после начала АРТ
(за исключением случаев, когда ТБ-ИРИС предшествовала их смерти). Для субанализа легких
функции, мы набрали удобную выборку пациентов, которые завершили
участие в исследовании когортного когорта, завершили лечение ТБ
без рецидива или рецидива туберкулеза, были на АРТ и не имели
симптоматическая легочная инфекция или другие признаки активного легочного
патологию во время теста на легочную функцию (PFT).

Мы получили доступ к клиническим переменным и мерам раннего
иммунологический ответ на АРТ из исходной базы данных исследования (Ravimohan et al., 2015a, Ravimohan et al., 2015b). Исходная кровь для MMP и иммунных ответов
оценки были собраны в среднем за 2 дня
(межквартильный диапазон [IQR]: от -14 до 0 дней) со дня АРТ
инициация. Второй кровоток был медиана 2 дня
(IQR: от 0 до 5 дней) с даты недели-4 после АРТ
инициация. В родительском исследовании пациенты, которые испытали ТБ-ИРИС в
первые 6 месяцев АРТ были определены в соответствии с
Международная сеть по изучению ВИЧ-ассоциированной ИРИС и СПИДа
Trials Group, как описано ранее (Meintjes et al., 2008, Ravimohan et al., 2015a, Grant et al., 2010). Кроме того, мы перспективно
сбор данных о курении, а также рост, вес и индекс массы тела
(ИМТ) во время ППФ, чтобы облегчить расчет прогностического легкого
функции, согласно рекомендациям Американского торакального общества (ATS) (American Thoracic Society
1995).

Ранее замороженная (- 80 ° C) плазма получала два разведения, 1: 5 и 1:50, чтобы находиться в пределах линейного
ассортимент. Мы обычно использовали разведение 1: 5 для определения MMP-1 (нижний предел
обнаружение [LLD]: 1,1 мкг / мл) и MMP-3 (LLD: 7,3 пг / мл) и разведение в 1:50 для количественного определения MMP-2 (LLD:
12,6 пг / мл), MMP-8 (LLD: 16,6 пг / мл) и концентрации MMP-9 (LLD: 13,7 пг / мл)
(R & D, Миннесота, США). Четыре из опрошенных 296 (1,3%) образцов
MMP-8, которые были ниже предела обнаружения и были зарегистрированы как
16,6 пг / мл для анализа.
анализ луминекса проводили в соответствии с протоколом производителя и
анализируется на платформе Biorad Bio-Plex2000.

Вкратце, мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) были
изолированы от цельной крови в начале исследования и 4-й неделе после начала АРТ, так как
ранее описанных (Ravimohan et al., 2013, Ravimohan et al., 2015a). В
ИФН-γ-иммуноферментный анализ (ELISPOT), 2 × 105 клеток инкубировали
в течение ночи с очищенным производным белка и без него (PPD, 5 мкг / мл, Statens Serum Institute), в трех повторностях и
в соответствии с протоколом производителя (BD Bioscience) (Ravimohan et al., 2013, Ravimohan et al., 2015a). Пластины читались с помощью считывателя ImmunoSpot
(Cellular Technology Limited). Среднее число единиц формирования пятен
(SFU) после вычитания отрицательного контроля из стимулированного PPD
лунки определяли и выражали в виде РВМС SFU / 106.
Phorbol 12-миристат 13-ацетат (50 нг / мл) и иономицин
(500 нг / мл) (Sigma-Aldrich) использовали в качестве положительного
контроль. Для проточной цитометрии, описанной ранее (Ravimohan et al., 2015b)
криоконсервированные РВМС оттаивали в полной среде RPMI 1640 (Gibco)
содержащий 10% эмбриональной бычьей сыворотки (Bio-Products Gemini) и ДНКазы (50 мкг / мл, Sigma Aldrich). Клетки стимулировали в течение 6 ч с и без PPD (5 мкг / мл) и
совместно стимулируется CD28 / CD49d (BD FastImmune). Клетки окрашивали
LIVE / DEAD фиксированная аква, анти-CD3-BV570 и анти-CD4-Qdot-705 для
идентификация живых CD4 + Т-клеток. внутриклеточный
окрашивание цитокином анти-IFN-γ-синим и анти-TNF-α-AF700 было
выполнено. Антитела были получены от Biolegend, eBiosciences и Life
Технологии. Окрашенные РВМС были проанализированы на LSR II (BD Biosciences) и
с использованием FlowJo версии 9.8.2 (TreeStar). Чтобы определить ответы, специфичные для ТБ,
частота клеток, экспрессирующих IFN-γ или TNF-α в отрицательном контроле, была
вычитается из соответствующего стимулированного PPD ответа.

ППФ проводились спирометрией в соответствии с ОВД
руководства с использованием USB-устройства SpiroOne (Micro Medical, U.K.)
(Американское торакальное общество
1995). Как минимум три и до 8 тестовых маневров за
пациент был проведен. Лучшие из трех максимальных усилий с меньшим
5% -ная вариация между маневрами считалась «действительной» и использовалась для анализа
(Американское торакальное общество
1995). Цикл объемного объема, генерируемый спирометрией
тест использовался для определения объема принудительного выдоха за одну секунду
(FEV1), принудительной жизненной емкости (FVC) и
FEV1 / FVC. Согласно рекомендациям ОВД, функция легких
был классифицирован как нормальный или ненормальный, где была определена нормальная функция легкого
как принудительный объем выдоха за одну секунду (FEV1) ≥ 80%, принудительная жизненная емкость (FVC) ≥ 80% и
Отношение FEV1 / FVC ≥ 70% от прогнозируемого
(American Thoracic Society, 1991, Pellegrino et al., 2005). Нарушенное легкое
функция была определена как FVC или FEV1 <80% от прогнозируемого значения и далее классифицирована как обструктивная (ОФВ1 / ФЖЕЛ <70% и FVC> 80% от прогнозируемых значений),
(FEV1 / FVC ≥ 70% и FVC <80% от прогнозируемого значения) или смешанные дефекты (FEV1 / FVC <70% и FVC <80% от прогнозируемых значений) (American Thoracic Society, 1991, Pellegrino et al., 2005). Европейское сообщество угля и стали (ECCS) контрольные значения использовались для определения процента прогнозируемых FEV1 и FVC (Quanjer et al., 1993), которые были предложены для общего использования в сходных африканских популяциях (White et al., 1996).

Непрерывные переменные были описаны с использованием медианов и IQR или
означает и диапазоны, основанные на распределении переменной. Описать
изменения в ММР на ранней стадии АРТ, парные показатели ММР на исходном уровне и
недельная инициация после АРТ-4 сравнивалась по каждому предмету Уилкоксоном
подписанные тесты ранга. Для первичного анализа TB-IRIS концентрации MMP
(экспозиция) были впервые сопоставлены между пациентами с ТБ-ИРИС (исход) и
оставшихся без ИРИС по суммарным испытаниям уровня Уилкоксона. Тесты были двусторонними и p
значения <0,05 считались статистически значительное. Логистическая регрессия использовалась для определения ассоциации между ранними изменениями концентраций ММР от базовой линии до 4-й недели (стратифицированные в квартили) и ТБ-ИРИС, корректировка ИМТ и использование невирапин (NVP), оба из которых были связаны с результатом в этом когорта (Ravimohan et al. 2015a). В исследовательском анализе функции легких, пациентов с ППФ сравнивали с пациентами без оценки функции легких от первичного анализа по критерию суммы рангов Уилкоксона. Спирмена коэффициент корреляции (r) использовался для определения взаимосвязи между Показатели ПФП (FEV1 и FVC) оцениваются после лечения ТБ завершение и раннее изменение от базовой линии до 4-й недели АРТ в 1) иммунологической ответ (количество CD4, а также TB-специфический иммунный ответ методом ELISPOT и проточная цитометрия) и 2) концентрации MMP после начала АРТ. связь между назначенной ATS аномальной легочной функцией после туберкулезной терапии и изменение в MMP определялось по суммам тестов уровня Уилкоксона. Базовые коэффициенты (например, предварительный анализ CD4 и концентрация MMP), которые могут потенциально Смешайте эту ассоциацию так же оценили. Функция легких в с историей TB-IRIS также сравнивали с теми, кто не имел истории IRIS с использованием теста хи-квадрат. Учитывая небольшие цифры, функция легких не корректируется для потенциальных помех. В одномерном анализ взаимосвязи между изменениями в MMP и IRIS, а также в сравнения между изменением иммунной функции, ММР и ППФ, неверные значения p и значения p, скорректированные для множественных сравнений с использованием метод Бенджамини-Хохберга (Benjamini and Hochberg, 1995). Stata (версия 11.2, Колледж-Стейшн, Техас) и GraphPad Prism (версия 5,0; Сан-Диего, Калифорния) были использованы для статистического анализа и генерировать графики, соответственно.

Это исследование финансировалось за счет грантов Национального
Институты здоровья (NIH) (номер гранта R01AI080337)
и Центр СПИДа Пенн
Исследования (AI045008). Спонсоры не играли
роль в сборе данных, анализе или интерпретации; дизайн исследования;
или набор пациентов. Нам не заплатили, чтобы написать эту статью любым
агентства или фармацевтической компании.

Сто семьдесят пациентов были зарегистрированы и начаты
на АРТ в родительском исследовании (Ravimohan et al., 2015a). Из этих пациентов 148 (74%)
имели парные данные ММР в начале и неделю после начала АРТ и имели право на
текущее исследование. Пациенты, которые были исключены, не были достоверно
отличные от тех, которые были включены в возраст, пол и количество CD4
на исходном уровне (данные не показаны). Тридцать два пациента (22%) разработали ТБ-ИРИС,
оставив 116 (78%) оставшихся без ИРИС. Клинические симптомы, связанные с
ТБ-ИРИС были прежде всего новыми или ухудшались респираторные жалобы, возникающие при
медиана 4 недель после начала АРТ (IQR: 4-12 недель) и были описаны ранее (Ravimohan et al., 2015a). Один
(3%) пациентов с TB-IRIS умерли через две недели после события IRIS, несмотря на
начальное улучшение терапии кортикостероидами и было включено в
первичный анализ как случай TB-IRIS (Ravimohan et al., 2015a). В целом, у пациентов была средняя
до АРТ-лимфоцитов CD4 в количестве 62 клеток / мкл (IQR: 32-94 клеток / мкл) и началось АРТ в течение 28 дней
(IQR: 19-47 дней) начала лечения ТБ (дополнительная
Таблица 1).

Существовала значительная неоднородность в отношении изменений
в концентрации ММР, измеренной от базовой линии до 4-й недели после АРТ
инициирование (рис.
1 и фиг.
1). Средние концентрации ММР-1, -2 и -3 уменьшались, тогда как ММР-8 и
9 значительно увеличились (все p <0,01, за исключением MMP-1, что было незначительным; Инжир. 1).

Пациенты с ТБ-ИРИС имели значительно больший
увеличивает концентрацию MMP-8 в АРТ по сравнению с контролем, не связанным с IRIS, в
нескорректированный анализ (p = 0,04;
Pcorr Поправка = 0,13;
Таблица
1). Каждый квартиль
увеличение MMP-8 от базовой линии до 4-й недели после начала АРТ было
независимо от 50% более высоких шансов TB-IRIS, после корректировки
для базового количества CD4, BMI и NVP (отношение шансов 1,5 [доверие 95%
интервал: 1.0-2.1]). Изменения во всех других MMP не были статистически
между группами (таблица
1).

ПФП проводили в удобной выборке у 14 пациентов
почти 2 года после стандартного 6-месячного курса
противотуберкулезная терапия (таблица
2), когда TB-ассоциированные
Было показано, что острый эффект на функцию легких стабилизировался
(Hnizdo et al.
2000). Подмножество пациентов с ППФ было относительно
представитель всей когорты, поскольку не было никаких существенных различий
между теми, у кого (n = 14) и без
(n = 134) Оценки PFT
(Дополнительная таблица 2). Кроме того, хотя изменения в MMP-1 и MMP-3
концентраций, а также TB-специфических IFN-γ + и
Частоты TNF-α + CD4 + T-клеток были
несколько отличаются для этой подгруппы по сравнению с общей когорты, они
не были статистически значимыми (дополнительная таблица 2). Половина
пациенты с PFT-анализом были женскими (n = 7), а два (14%) имели историю курения. Средний процент
предсказанный FEV1 для этих пациентов был ниже отсечки для
нормальная функция легких (78% [IQR: 66-83%]). Девять (64%) пациентов имели
Определенная ATS аномальная функция легких, из которых 5 (56%) были классифицированы как
обструктивная, 3 (33%) как ограничительная и 1 (11%) в виде смешанных легочных дефектов
(Таблица
2).

Увеличение MMP-8, но не других ММР, рано после АРТ
инициация была сильно связана с более низким FEV1 после
Окончание лечения туберкулеза (p = 0,02;
Pcorr Поправка = 0,09;
Таблица
3 и фиг.2а). Оценка связи между аномальным легким
функции и изменения в ММР показали, что увеличение ММР-8 на АРТ было
связанные с аномальной легочной функцией, тогда как те, у кого нормальная функция легких
как правило, было раннее снижение MMP-8 (p = 0,04;
2b и дополнительная таблица 3). Кроме того, сильный
обратная корреляция наблюдалась между величиной роста CD4
считать от базовой линии до 4-й недели АРТ и прогнозируемого процента
FEV1 после завершения лечения ТБ (p = 0,006; pcorr = 0,05; Таблица 3 и рис.
3а). Увеличение
IFN-γ, высвобождаемый общим PBMC, а также IFN-γ + или
Частота TNF-α + CD4 + T-клеток также
как правило, коррелирует с более низким процентным прогнозом FEV1
после завершения лечения ТБ; однако эти отношения не были
статистически значимые (Таблица
3; Инжир.
3b и c).

Кроме того, у 3 (21%) из 14 пациентов с ППФ-анализом
история парадоксального ТБ-ИРИС. Начало ИРИС среди этих трех пациентов
4, 4 и 16 недель после начала АРТ, и симптомы
сохраняется между 4 и 8 неделями. Эти пациенты представлены
с признаками и симптомами, согласующимися с ТБ-ИРИС, такими как новое начало шейного отдела
лимфаденопатия, а также респираторные жалобы, которые включали одышку
и боли в груди. Увеличение количества CD4 на АРТ среди трех случаев ТБ-ИРИС было
69, 126 и 181 клеток / мкл и вирусная нагрузка ВИЧ уменьшилась
медиана — 3,0, — 2,7 и — 2,2 log10 копий / мл. У пациентов с ТБ-ИРИС было значительно хуже FEV1
значения, чем значения без IRIS (средний процент прогнозируется
FEV1 = 65%, [IQR:
46-72] против 79% [IQR: 76-86]; p = 0,04 соответственно). Кроме того, больные ТБ-ИРИС имели значительно
более низкое соотношение FEV1 / FVC по сравнению с контрольными элементами без IRIS (медиана
процентов предсказано FEV1 / FVC = 75 [IQR: 60-76] против 100 [IQR: 81-110], соответственно,
р = 0,02).

Поскольку у нас не было исходных данных о функции легких
участников и ассоциаций между изменениями концентраций ММР и CD4
подсчеты и функция легких могли повлиять на различия в этих
параметров при первоначальном представлении мы сравнили базовые уровни CD4
подсчеты и концентрации ММР среди пациентов с аномальным легким и без него
(дополнительная таблица 3). Пациенты с ATS-определенным аномальным легким
функция имела тенденцию иметь более низкие медианные показатели CD4 до АРТ; немного длиннее
интервал между противотуберкулезной терапией и началом АРТ; и более низкую до-ART MMP-8
концентрации по сравнению с пациентами с нормальной функцией легких; Однако,
эти ассоциации не достигли статистической значимости (Supplemental
Таблица 3).

В этом исследовании мы исследовали циркулирующие концентрации ключа
MMP до и вскоре после начала АРТ среди относительно большой когорты
продвинутые ВИЧ-инфицированные пациенты одновременно лечились активным pTB. Хотя там
была существенной гетерогенностью в ранних изменениях ММР, концентрациях ММР-8 и
-9 значительно увеличились в отношении АРТ, а более ранние ММР-8 увеличились
связанных с TB-IRIS и снижением функции легких через несколько месяцев после лечения туберкулеза,
время, когда туберкулезное повреждение легких обычно стабилизировалось (Hnizdo et al., 2000). По аналогии,
быстрое увеличение количества CD4 на ранних стадиях после АРТ также было связано с ухудшением
после операции по лечению туберкулеза. Эти данные в сочетании с данными
что ММР и клеточные иммунные ответы являются ключевыми для гранулемы и полости
образование в туберкулезе (Salgame, 2011, Dutta and Karakousis, 2014), поддерживают гипотезу, в которой ранние
изменения иммунной функции и соответствующих тканевых протеаз после АРТ
инициирование способствует долгосрочному дефициту легочной функции после туберкулезного лечения в
ВИЧ / ТБ. Наши данные также показывают, что пациенты с клинически очевидными
воспалительные события, такие как ТБ-ИРИС, могут быть особенно
риск.

Предыдущие работы показали, что ММР уменьшают коллаген легких
матрицы и опосредуют разрушение тканей легкого в ТБ (Ong et al., 2014, Elkington et al., 2011, Elkington and Friedland, 2006, Ong et al., 2015). Таким образом, наши
что системные концентрации MMP-8 и MMP-9 быстро растут
после начала АРТ, а также связи между увеличением MMP-8
и TB-IRIS, который часто характеризуется респираторными жалобами
(Meintjes et al., 2008, Naidoo et al., 2012, Luetkemeyer et al., 2014), предлагают
что ВИЧ-инфицированные пациенты с активным легочным туберкулезом могут подвергаться риску заражения
иммуно-опосредованное повреждение легких после начала АРТ. Хотя несколько последовательный
отношения возникли с MMP-8 и результатами в этом исследовании, примечательно, что
концентрации ММР-1, -2 и -3, которые также участвуют в легких
разрушение ткани (Ong et al., 2014, Elkington et al., 2011, Elkington and Friedland, 2006), уменьшились или остались неизменными при АРТ. Один
возможно, что ММП-1 и -2 имеют сильно разделенную экспрессию на
сайт инфекции, как показано в исследовании плеврального туберкулеза
(Hoheisel et al.
2001). Кроме того, в другом исследовании показано, что рифампицин может
downregulate MMP-3 экспрессия in vitro, что может объяснить уменьшение в
циркулирующих концентраций ММР-3 у наших пациентов, все из которых были на этом
лекарственный препарат (Singh et al.
2014). Наши результаты в целом согласуются с поперечным сечением
исследование ММР в парадоксальном TB-IRIS Tadokera et al., где концентрация
MMP-7 в MTB-стимулированных супернатантах и ​​сыворотке культуры PBMC были значительно
выше у пациентов с TB-IRIS (n = 22)
по сравнению с контрольными элементами без IRIS (n = 22)
(Tadokera et al.
2014). Исследование Tadokera не обнаружило связи между
MMP-8 и IRIS при оценке MTB-стимулированных РВМС (Tadokera et al., 2014); однако это может
относятся к тому факту, что MMP-8 преимущественно секретируется нейтрофилами
(Hasty et al., 1986, Parks et al., 2004), которые теряются при изоляции PBMC
обработать. Концентрации ММП очень динамичны при лечении ТБ
(Ugarte-Gil et al.
2013), и поэтому различия между этими двумя исследованиями могут
также относятся к тому факту, что пациенты в исследовании Tadokera имели
более длительное время начала АРТ после начала лечения ТБ, чем те, которые включены
здесь (56 против 28 дней), тогда как время до TB-IRIS было заметно
короче (14 против 28 дней) (Tadokera et al., 2014). Наши относительно большие
населения почти 150 пациентов с развитой ВИЧ / ТБ и последовательной
связь между изменениями концентраций MMP-8 и TB-IRIS и легких
функции указывают на важную роль для восстановления MMP-8 при воспалительных событиях и
повреждение ткани при АРТ, которое должно быть исследовано более подробно. взятый
вместе, эти два исследования показывают, что дополнительные исследования по патогенезу
повреждения тканей у пациентов с АРТ с ВИЧ / ТБ.

Связь между восстановлением Т-клеток CD4 и
нарушение функции легких, измеренное как насыщение кислородом, показано в
мышиная модель для ИРИС с использованием Mycobacterium avium
(Barber et al.
2010). Однако наше исследование исследовано
связь между парадоксальным ТБ-ИРИС, изменение ММР на АРТ и
легочной функции после туберкулезной терапии среди ВИЧ-инфицированных больных туберкулезом. наш
оценка функции легких продемонстрировала не только более низкий FEV1 в
Пациентов с ТБ-ИРИС по сравнению с контролем, не связанным с ИРИС, но также и с тем, что величина
раннее увеличение клеток CD4 и циркулирующие концентрации MMP-8 после АРТ
инициация была связана с нарушением лечения после ВТВ1 с нарушением зрения.
Хотя число пациентов, оцениваемых с использованием ППФ, было небольшим, и это подмножество может
не должны быть полностью репрезентативными для большей когорты в отношении определенных ММР
(т. е. MMP-1 и -3) и TB-специфических иммунных ответов, сила
ассоциации (r = — 0,7
и r = — 0,6)
что необходимы дальнейшие исследования этой ассоциации. Обесценение
FEV1, который в основном измеряет поток воздуха через большие
дыхательных путей, подходит для эндобронхиального поражения, характерного для ТБ, и с
по крайней мере, один анекдотический отчет об облитерированных бронхиолитах после АРТ
инициирование ВИЧ / ТБ (Lawn et al.
2009). Хотя наши результаты были среди передовых пациентов с ВИЧ / ТБ
инициируя АРТ, они призывают будущие исследования исследовать повреждение конечных органов в
ТБ-ИРИС и в более общем плане среди ВИЧ-инфицированных больных ВИЧ / ТБ, инициирующих АРТ.
Нарушение центральной нервной системы (ЦНС) после ассоциированного с ТБ-менингитом IRIS
также вызывает беспокойство, поскольку значительное локальное увеличение клеточного иммунитета
функции и MMP были отмечены ранее (Marais et al., 2014).

Механически уменьшено вовлечение легких в продвинутые
ВИЧ-инфицированные пациенты были связаны с низким числом лимфоцитов CD4 и снижены
концентрации ММР, оба из которых важны для образования гранулемы и
кавитация (Kwan and Ernst, 2011, Post et al., 1995, Walker et al., 2012, Zhang et al., 1994, Law et al., 1996). Хотя мы не определяли источник ММР,
нейтрофилы также могут быть задействованы, как обсуждалось выше. Нейтрофилы, которые
отмечен как преобладающий тип фагоцитарных клеток в дыхательных путях больных туберкулезом
(Eum et al., 2010),
как было показано, экспрессируют MMP-8 и -9 в оболочке полостей TB (Ong et al., 2015), поддерживая
возможную роль в патогенезе нарушения легких мы наблюдали. это
правдоподобно, что восстановленная активность CD4-Т-клеток и нейтрофилов после АРТ
инициирование в условиях неполного лечения туберкулеза, в частности, способствует
рост концентраций MMP-8 в АРТ, как видно здесь (Appelberg, 1992, Zhang et al., 1992).
Инфильтрация нейтрофилов на участок заболевания вскоре после начала АРТ
предложено в исследовании туберкулезного менингита IRIS среди ВИЧ-инфицированных пациентов
(Marais et al.
2013). Кроме того, экспрессия MMP-8 отличается от других ММР в
что нейтрофилы содержат гранулы с предварительно синтезированной ММП-8 и имеют
потенциал для секреции MMP-8 быстро при активации (Elkington and Friedland, 2006, Hasty et al., 1986, Weiss et al., 1985). Таким образом, последующее увеличение
иммунная функция и ММР на АРТ, возможно, вызванные нейтрофилами, могут
потенциально лежат в основе повреждения поврежденных тканей легких и ухудшения воздушного потока
препятствие, которое часто сопровождает туберкулез (Pasipanodya et al., 2010, Hnizdo et al., 2000, Ralph et al., 2013). Наш сбор данных не включал
нейтрофилов, но эти результаты нуждаются в подтверждении в более крупных исследованиях, где
продольные оценки иммунной и легочной функции оцениваются более
подробно. Кроме того, будущие исследования должны быть направлены на определение основного сайта
повреждение легких и преобладающая форма дефектов вентилятора при ВИЧ-инфекции и туберкулезе
пациенты после завершения лечения pTB.

Наше исследование было ограничено относительно небольшим числом пациентов
с PFT, что ограничило нашу оценку потенциального смешения. Другая
Важным ограничением нашего исследования является то, что у нас не было исходной функции легких
оценки для определения того, будут ли пациенты с легочной недостаточностью после туберкулезного лечения
завершение, как измерено здесь, также начиналось с ухудшения функции легких до
Начало АРТ. Тем не менее, пациенты в исследовании, у которых была аномальная функция легких
после лечения, как правило, имели более низкие показатели CD4 до АРТ и концентрацию MMP-8, как
из которых связаны с меньшим вовлечением легких в ВИЧ / ТБ (Kwan and Ernst, 2011, Walker et al., 2012, Law et al., 1996). Кроме того, рентгенограммы грудной клетки,
которые у нас не были на исходном уровне или во время последующих действий,
позволили оценить вовлеченность легких во время лечения. Другое ограничение
наше исследование состояло в том, что мы исключили пациентов, которые не выдержали до 6 месяцев после начала АРТ из наших анализов. Эти пациенты могут
имели плохую функцию легких. Однако, поскольку целью нашего исследования было исследование
детерминанты нарушения легких после завершения лечения туберкулеза, мы исключили
когда они не выжили до этого момента.

Таким образом, быстрые изменения концентраций нескольких ММР
были обнаружены на АРТ, где повышение MMP-8 было независимо связано с
TB-IRIS. Увеличение клеточной иммунной функции и MMP-8 после начала АРТ
был также связан с депрессивной функцией легких через несколько месяцев после туберкулезного лечения. ММР
как MMP-8, могут быть потенциальными мишенями для направленной на хозяина терапии, если они обнаружены
опосредуют повреждение легких в будущих исследованиях, цель которых — определить механизмы
повреждение легких при ВИЧ / ТБ. В частности, связь между реверсией
пациенты к более иммунокомпетентному фенотипу, обеспечиваемому мощным АРТ, с легким
ущерб следует изучить дальше.

Задумано и разработано исследование и эксперименты: SR DW GPB.
Зарегистрированные пациенты: NT. Облегченное исследование в Ботсване: NT APS. Выполнено
легочные функциональные тесты: SJK. Выполняли эксперименты: SR KN. Проанализировали
данные: SR SJK GPB. Используемые реагенты / материалы / инструменты анализа: SJK DW GPB.
Написал первый черновик рукописи: SR GPB. Способствовал написанию
рукопись: SR NT SJK KN APS RG DW GPB. Согласитесь с результатами рукописи и
выводы: SR NT SJK KN APS RG DW GPB.

У авторов этого исследования нет конфликта интересов
объявить.

Дополнительный материал

Мы благодарим поставщиков медицинских услуг, которые направили пациентов, и
пациенты, которые вызвались участвовать в этом исследовании.

Дополнительные данные к этой статье можно найти в Интернете по адресу
http://dx.doi.org/10.1016/j.ebiom.2015.11.040.

Концентрации ММП изменяются вскоре после начала АРТ в
продвинутых пациентов с ВИЧ / ТБ. Анализ Luminex использовали для количественного определения
плазменные концентрации матричной металлопротеиназы (ММП) -1, -2, -3, -8 и -9
pre-(серый) и 4-й недели после начала АРТ (черный) в продвинутом ВИЧ / ТБ
коинфицированные пациенты (n = 148). Медиана MMP
концентрации с межквартильными диапазонами показаны красным цветом. Улица Вилкоксона
тест был использован для сопоставления исходной базовой пары и 4-й недели после АРТ-концентрации
ММП у всех пациентов. Не уточнено = Несущественный, * p <0,01, ** p <0,001, *** p <0,0001.

Увеличение концентрации MMP-8 от базовой линии до недели
4 инициирование после АРТ связано с (а) меньшим объемом вытесненного экспиратора в
одна секунда (FEV1) и (b) аномальная функция легких после туберкулеза
лечение у ВИЧ-инфицированных пациентов с историей активного pTB.
FEV1 измеряли при тестировании функции легких после туберкулеза
завершение лечения у ВИЧ-инфицированных пациентов (n = 14) для определения процента, ожидаемого от нормы. Нормальный и ненормальный
легкие определялись в соответствии с рекомендациями Американского торакального общества (ОВД).
ММР-8 измеряли с помощью анализа люминекса. Показана корреляция Спирмена
коэффициент (r) и соответствующее значение p (a), а также значение p из
Процент оценки уровня Уилкоксона, сравнивающий пациентов с нормальными с ненормальными
функции легких (б).

Более позднее завершение лечения после ТБВ1
коррелирует с большим увеличением иммунной функции от базовой линии до 4-й недели
пост-АРТ-инициация у ВИЧ-инфицированных пациентов с историей активного рТБ.
Принудительный объем выдоха за одну секунду (FEV1) измеряли
легочная функция тестирования после туберкулезной терапии у ВИЧ-инфицированных пациентов
для определения процентов, ожидаемых от нормы. Показаны корреляция Спирмена
коэффициенты (rho: r) и соответствующие значения p, сравнивающие проценты, предсказанные
FEV1 изменится с базового уровня на 4-ю неделю после АРТ в (а) CD4
count (n = 14) и (b) частота IFN-γ
и (c) TNF-α, продуцирующий CD4 + Т-клетки (n = 10) при стимуляции PPD.

Переход от базовой линии к 4-й неделе после начала АРТ в
ММР и связь с ТБ-ИРИС среди передовых ВИЧ / ТБ, коинфицированных
пациентов.

Оценка суммы рангов Wilcoxon использовалась для сравнения элементов управления с
ТБ-ИРИС. P <0,05 статистически значимый. IQR = межквартильный диапазон.

Клинические характеристики и легочная функция после туберкулеза
завершение лечения у продвинутых пациентов с ВИЧ / ТБ.

Показаны характеристики на исходном уровне и при
поперечное сечение для пациентов, которым проводилось легочное функциональное тестирование (PFT)
завершение после туберкулезной терапии. IQR = межквартильный диапазон; BMI = масса тела
индекс; ATT = противотуберкулезная терапия;
FEV1 = принудительный
объем выдоха за 1 с; FVC = принудительная жизненная емкость.

Ассоциация легочной функции после туберкулезной терапии
завершение и изменение от базовой линии до 4-й недели после начала АРТ в иммунной
параметров и ММР у ВИЧ-инфицированных пациентов с историей лечения
РТВ.

Показаны коэффициенты корреляции Спирмена
(Rho) #. Значение Pcorr = p, скорректированное для нескольких сравнений
используя метод Бенджамини-Хохберга. * IFN-γ, продуцируемый периферической кровью
мононуклеарные клетки (РВМС) измеряли методом ELISPOT. РВМС стимулировали
с очищенным производным белка (PPD) для измерения ТБ-специфических иммунных ответов
(SFU) / 106 PBMC. ** Частота
CD4 + Т-клетка, экспрессирующая IFN-γ или TNF-α в ответ на PPD
стимуляция оценивали окрашиванием и потоком внутриклеточного цитокина
цитометрии.

Комментариев нет.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *