Нажмите "Enter", чтобы перейти к контенту

Эффективность основного антигена HCV и количественного определения РНК у инфицированных HCV и пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1

Effectiveness of HCV core antigen and RNA quantification in HCV-infected and HCV/HIV-1-coinfected patients
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4225041/

Было показано, что определение основного антигена вируса гепатита С (HCV-coreAg) является показателем активной инфекции HCV. Целью настоящего исследования было 1) исследовать стабильность и эффективность количественного определения HCV-coreAg и HCV-РНК при HCV-инфекции с коинфекцией или без нее, 2) исследовать связь между HCV-coreAg / HCV-РНК (Ag / РНК) и иммунного статуса у пациентов с хроническим гепатитом С / ВИЧ-1.

В августе 2009 года было начато продольное исследование, состоящее из 227 пациентов с HCV-моноинфекцией (n = 129) и HCV / HIV-1 (n = 98) и 139 (73 с моноинфекцией HCV и 66 с коинфекцией HCV / HIV-1 ) наблюдались в августе 2012 года. В этой криоконсервированной плазме были определены как Квантовый антиген HCV, так и РНК HCV. Впоследствии проводили анализ антигена основного гепатита С и количественной оценки РНК ВГС. Кроме того, был проведен эксперимент in vitro, исследующий возможность деградации компонентов HCV (основной антиген и РНК).

Значительные и стабильные корреляции (р <0,001) наблюдались как у пациентов с хроническим HCV-моноинфицированным, так и с HCV / ВИЧ-1-коинфекцией в течение 3-летнего наблюдения. У пациентов с коинфекцией с ослабленным иммунитетом состояние было значительно выше (p <0,05) Ag / РНК, чем у пациентов с иммунокомпетентным состоянием как в двух временных точках (2009, так и в 2012 году). Более того, отношения Ag / RNA отрицательно коррелировали с количеством CD4 + T-клеток (p <0,001). Эксперимент in vitro исследовал возможность более медленной деградации частиц HCV в условиях иммунодефицита, связанных с ВИЧ, и данные показали, что отношения Ag / РНК были значительно выше в ВИЧ-1-положительной плазме, чем в здоровой плазме (p = 0,005 ) в этом исследовании.

В нашем продольном исследовании показано, что HCV-coreAg представляет со временем сопоставимую динамику как РНК HCV у пациентов с хроническим HCV-инфицированием. Между тем, отношение HCV-coreAg / HCV-РНК было тесно связано с иммунным статусом у пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1.

Онлайн-версия этой статьи (doi: 10.1186 / s12879-014-0577-1) содержит дополнительный материал, доступный для авторизованных пользователей.

Вирус гепатита С (HCV) является одной из основных причин цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы [1]. Около 170 миллионов человек во всем мире хронически инфицированы ВГС, а 34 миллиона человек в настоящее время страдают от вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) [2] — [4]. Коинфекция HCV / ВИЧ-1 распространена из-за их общих путей передачи. В Китае более высокий показатель распространенности коинфекции в нескольких провинциях был связан с антисанитарной коммерческой кровью [4] — [7]. В клинической практике, в качестве рутинного скринингового теста для диагностики HCV-инфекции, анализ против HCV имеет тот недостаток, что не удается отличить активную инфекцию от предшествующей инфекции, которая разрешилась спонтанно или после противовирусного лечения. Кроме того, ложноположительные тесты против ВГС часто встречаются у беременных женщин и пациентов с нефрологическими или ревматоидными заболеваниями [8]. С другой стороны, наше предыдущее наблюдение [9] указывает на то, что ложноотрицательные результаты против HCV становятся все более частыми у пациентов с ослабленным иммунитетом, особенно со СПИДом.

RT-PCR в реальном времени — альтернативная стратегия, которая не имеет этого недостатка. Однако обнаружение HCV-РНК в RT-PCR в реальном времени требует навыков, занимает много времени и слишком дорого для первичных больниц, несмотря на его заслугу в оценке репликации HCV [10], [11].

Другой более дешевой альтернативой вместо обнаружения HCV-РНК является количественная оценка основного антигена вируса гепатита С (HCV-coreAg). В нашем предыдущем исследовании [9] и др. [12] — [17] широко исследовалась потенциальная применимость этой стратегии для диагностики активной инфекции HCV и мониторинга антивирусного ответа из-за его корреляции с RT-PCR, а также его простота автоматизации. Несмотря на эти преимущества, дальнейшее улучшение предела обнаружения теста HCV-coreAg все еще очень желательно [8]. В последнее время Garbuglia et al. [18] продемонстрировал, что HCV-coreAg также представляет собой адекватный инструмент для определения активной HCV-инфекции у пациентов с коинфекцией HCV / HIV с различным генотипированием HCV. В настоящем докладе описывается трехлетнее продольное исследование для дальнейшего исследования стабильности и эффективности количественного определения HCV-coreAg и HCV-РНК при HCV-инфекции с коинфекцией ВИЧ-1 или без нее.

В августе 2009 года было начато исследование продольного исследования 227 пациентов с HCV-моноинфекцией (129 человек) и пациентов с коинфекцией (HCV / HIV-1) (98 человек). Пациенты были жителями деревни в графстве Шанджай, провинция Хэнань в центральной части Китай, с взрослым населением в 1252 человек. Ранее сообщалось о высокой распространенности передаваемого через кровь СПИДа и хронического гепатита С в той же деревне [19]. Из 227 пациентов, изначально зарегистрированных, 139 (73 с моноинфекцией HCV и 66 с коинфекцией HCV / ВИЧ-1) были проведены в августе 2012 года; другие 88 были потеряны из-за смерти или потери контакта. Все 139 пациентов были подтверждены положительной реакцией на тест РНК HCV плазмы, и ни один объект не был обнаружен, чтобы превратить РНК HCV в конце наблюдения. Блок-схема для набираемых лиц показана на рисунке 1. Инфекция HCV определялась положительным ответом против HCV и положительными результатами для обнаружения HCV-РНК. ВИЧ-1-инфекция была выявлена ​​положительными ответами против ВИЧ. Все набранные пациенты были отрицательными для поверхностного антигена гепатита В (HBsAg) и никогда не получали никаких форм антивирусной терапии, специфичной для HCV.
Блок-схема для набираемых лиц в исследовании.

Все пациенты с коинфекцией HCV / HIV-1 ранее получали регулярное или прерывистое ВИЧ-специфическое лечение с использованием высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ), состоящей из двух нуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы (НИОТ): азидотимидин (AZT) плюс диданозин (ddI) (~ 60 %); или ставудин (d4T) плюс ламивудин (3TC) (~ 40%) и один ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы (NNRTI): невирапин (NVP). Лечение было оказано при поддержке программы CARES (Community AIDS Resource and Education Services). Все участники были опрошены обученным и квалифицированным персоналом с использованием стандартизированного вопросника, включая подробную общую информацию, историю донорства крови и использование противовирусных или антиретровирусных препаратов. Клинические исследования 139 пациентов, прошедших наблюдение, показаны в дополнительном файле 1: Таблица S1. Исследование было одобрено институционными органами по обзору Научного центра здоровья Пекина (ID утверждения: PKUPHLL20090011). Все пациенты предоставляли письменное информированное согласие до поступления в исследование.

Сыворотка и антикоагулянтная плазма ЭДТА немедленно хранили при -80 ° С после сбора. Несколько индексов функции печени, аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ) и γ глутамилтранспептидаза (γ-GT), общий белок, альбумин и билирубин были измерены традиционными клиническими стандартизованными методами на синхронной клинической системе Unicer Dxc 800 (Beckman Coulter, Fullerton, CA, USA). Кроме того, уровень жировой печени набранных пациентов оценивался с помощью ультрасонографии [20].

Плазменное антитело против HCV было обнаружено с использованием анализа Abbott Architect против HCV (Abbott GmbH & Co KG, Висбаден, Германия); Анти-HCV-статус всех положительных анти-HCV был подтвержден анализом HCV-RIBA (Wantai Biological Pharmacy), который использует рекомбинантные белки (Core, NS3, NS4 и NS5), иммобилизованные как отдельные полосы на тест-полоски. Интенсивность полос HCV оценивается по интенсивности внутренних контролей IgG как 5 различных уровней: 0 (none), +, ++, +++, ++++, согласно инструкциям производителя. Тест на скрининг на ВИЧ-1 проводился в местном центре по контролю и профилактике заболеваний (CDC) и был основан на анализе ELISA антител к ВИЧ-1 (GBI Biotech Co., Ltd., Пекин, Китай), и все положительные тесты были подтверждены HIV Blot 2.2 WB assay (ВИЧ-блот 2,2 WB, Genelabs Diagnostics, Singapore).

Измерение количеств плазменной HCV-coreAg проводили с использованием коммерческого хемолюминесцентного иммуноанализа микрочастиц (CMIA) (ARHITECT HCV Ag Reagent Kit, Abbott Diagnostics, Abbott Park, USA) с пределом обнаружения 3 фмоль / л в соответствии с инструкциями производителя.

Измерения плазменной HCV-РНК проводили с использованием набора амплификации Abbott Real-Time HCV (Abbott Molecular Inc. Des Plaines, IL, США) в соответствии с инструкциями производителя. Предел обнаружения составлял 30 МЕ / мл, что эквивалентно 1,48 log10 МЕ / мл, с процедурой подготовки образца 0,2 мл.

Все реагенты были приобретены у BD Biosciences (BD Biosciences, San Jose, CA), а количество лимфоцитов CD4 + / CD8 + было измерено в течение 12 часов с использованием FACSCalibur (BD Biosciences, San Jose, CA).

Образцы плазмы были собраны от семи ВИЧ-1-моноинфицированных пациентов и восьми здоровых людей с их информированным согласием в 2012 году. Для каждого пациента 3 мл плазмы были поровну разделены на три микропробирки объемом 1,5 мл. Затем 200 мкл HCVcc (вирус HCV-JFH1, 1 × 107 копий / мл) собирали из супернатанта клеточной культуры JFH1-tansfected Huh 7.5.1 клеток (поддерживали в модифицированной Дульбекко среде Eagle [DMEM], дополненной 10% фетальным бычьей сыворотки) и добавляли в каждую 1,5-миллилитровую микротрубу. Среда DMEM использовалась в качестве контроля пустого. Образцы ВИЧ-1-инфицированных плазмы (и контрольные только для среднего) инкубировали в инкубаторе CO2 при 37 ° С в течение 0 и 12 часов отдельно, а затем сразу же замораживали до тестирования для HCV-coreAg и HCV-РНК. Клинический опыт семи ВИЧ-1-моноинфицированных пациентов и восьми здоровых лиц показан в дополнительном файле 2: Таблица S2.

Показанная описательная статистика была срединной с 25% и 75% процентилями, если это необходимо. Сравнение между группами проводилось с использованием непарных t-тестов или U-тестов Манна Уитни. Все статистические анализы были выполнены с использованием GraphPad Prism для Windows, версия 5.0 (GraphPad Software Inc., Сан-Диего, Калифорния). Все p-значения были двухсторонними и считались значимыми, когда они были ниже 0,05.

Настоящее исследование подтвердило, что у пациентов с моноинфекцией HCV HCV-coreAg и HCV-РНК были достоверно коррелированы в двух разных временных точках (2009, HCV-1b: r = 0,802, p <0,001, HCV-2a: r = 0,786 , p <0,001; 2012, HCV-1b: r = 0,919, p <0,001, HCV-2a: r = 0,944, p <0,001, фиг. 2A). Аналогично, HCV-РНК и HCV-coreAg также коррелировали в обоих временных точках у пациентов с коинфекцией ВИЧ-1 (2009, HCV-1b: r = 0,841, p <0,001, HCV-2a: r = 0,962, p < 0,001; 2012, HCV-1b: r = 0,706, p <0,001; HCV-2a: r = 0,899, p <0,001, фиг. 2A). Кроме того, 100% положительных образцов HCV-РНК были также положительными по анализу HCV-coreAg (данные не показаны). Рисунок 2 Корреляция была показана между концентрацией основного антигена вируса гепатита С (HCV-coreAg) и HCV-РНК в двух временных точках. (A) Уровни HCV-coreAg были сильно коррелированы с нагрузкой на сыворотку HCV-РНК, как у пациентов с коинфекцией HCV-моноинфицированных, так и с HCV / HIV-1 в 2009 и 2012 годах, для генотипов HCV 1b (●) и 2a (○ ). (B) Корреляция концентрации ΔHCV-coreAg (log10fmol / L в 2012 году - log10fmol / L в 2009 году) и концентрации ΔHCV-РНК (log10IU / mL в 2012 году - log10IU / mL в 2009 году) в двух временных точках как при HCV-моноинфицированном, так и в Пациенты с HCV / ВИЧ-1-коинфекцией. Проведено ранговое сопоставление Спирмена. Все значения log10-трансформируются, p <0,05 указывает на значимость.

Чтобы четко отразить динамику корреляции между HCV-РНК и HCV-сердечникомA в двух разных временных точках, различия в концентрации HCV-coreAg (ΔHCV-coreAg = концентрация при концентрации 2009 года в 2012 году) и уровни HCV-РНК (ΔHCV- РНК = концентрация в 2009 году — концентрация в 2012 году). Как показано на рисунке 2B, сильная корреляция (r = 0,595, p <0,001) наблюдалась между ΔHCV-РНК и ΔHCV-coreAg у пациентов с моноинфекцией HCV, и аналогичная положительная корреляция наблюдалась у пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1 (r = 0,844, p <0,001). Этот результат показал, что HCV-coreAg и HCV-РНК изменялись параллельно друг с другом в течение 3-летнего наблюдения.

Затем мы исследовали связь между отношением HCV-coreAg к HCV-РНК (Ag / РНК) и иммунным статусом у пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1. Интересно отметить, что когда пациенты с коинфекцией HCV / HIV-1 были разделены на две группы в зависимости от изменения количества лимфоцитов CD4 + в двух временных точках, пациенты с CD42012≥ CD42009 показали более низкое отношение ΔAg / РНК (отношение 201 к-2007), чем пациентов с CD42012

Представленные выше данные показали, что отношения Ag / RNA отрицательно коррелировали с количеством CD4 + T-клеток. Вполне возможно, что более высокая скорость деградации HCV-РНК и / или более медленная скорость распада HCV-coreAg в условиях ВИЧ-ассоциированного иммунодефицита могут частично отвечать за это. Чтобы поддержать нашу гипотезу, был проведен эксперимент in vitro, исследующий возможность деградации частиц HCV. Эксперимент проводился в среде здоровой и ВИЧ-1-положительной плазмы, как показано в «Материалах и методах». Эти условия имитируют HCV-моноинфицированную и HCV / ВИЧ-1-коинфицированную плазму, соответственно, и поэтому подходят для оценки динамики деградации основного белка HCV и РНК во время инкубации при 37 ° C в течение 12 часов.

После инкубации при 37 ° С в течение 12 часов средний уровень HCV-РНК снижался до 33,49%, 54,92% и 73,16% начальных уровней в средней, здоровой плазме и ВИЧ-1-положительной плазме соответственно, тогда как при В то же время средний уровень HCV-coreAg снизился до 9,16%, 46,16% и 42,45% от начальных уровней. Скорости распада HCV-РНК и HCV-coreAg в течение 12 часов были значительно ниже в среде, чем в здоровой плазме (HCV-РНК: p <0,001, HCV-coreAg: p <0,001) и в ВИЧ-1-положительной плазме (HCV- РНК: p <0,001, HCV-coreAg: p <0,001) (фиг. 4A). Скорость распада HCV-РНК в здоровой плазме была значительно ниже, чем у ВИЧ-1-положительной плазмы (p = 0,035), в то время как аналогичная разница не наблюдалась при распаде HCV-coreAg (p> 0,05). Кроме того, мы обнаружили, что отношения Ag / РНК в ВИЧ-1-положительной плазме были значительно выше, чем в здоровой плазме (p = 0,005, Рисунок 4B). Разумеется, следует отметить, что влияние клеток крови на деградацию HCV не рассматривается в этом эксперименте in vitro.
In vitro
эксперимент по деградации частиц вируса гепатита С
, Изменения динамики деградации HCV-РНК и HCV-coreAg, (A) в среде, ВИЧ-1-положительной и здоровой плазме после инкубации при 37 ° C в течение 12 часов. Ось X указывает на деградацию HCV-РНК или HCV-coreAg через 12 часов, выраженную в процентах от начальных уровней. (В) соотношение HCV-coreAg / HCV-РНК в 12 часов в ВИЧ-1-положительной плазме было значительно выше, чем в здоровой плазме. Были проведены непарные t-тесты и U-тесты Mann Whitney, p <0,05 указывает на значимость.

На рисунке 5 сравнение анти-HCV Ab среди трех групп рекрутированных участников опроса 2009 года (включая 129 субъектов с HCV-моноинфекцией, 34 пациента с коинфекцией HCV / ВИЧ-1 с CD4 ≥ 500 / мм3 и 64 коинфицированных субъектов с CD4 <500 / мм3) проводили анализом анти-HCV архитектора и анализом HCV-RIBA соответственно. Как показано на фиг.5А, титр анти-HCV Ab с коинфекцией CD4 <500 / мм3 был самым низким уровнем среди трех групп (р <0,001 и р = 0,004, отдельно). Кроме того, данные HCV-RIBA (рис. 5B) показали, что ответы против HCV, вызванные белками Core, NS3, NS4 и NS5, были самыми высокими у пациентов с моноинфекцией HCV, в меньшей степени были обнаружены в коинфекции HCV / HIV с CD4 ≥ 500 / мм3 и самый низкий при коинфекции с CD4 <500 / мм3.На фиг.5 Анти-HCV-статус моноинфекции HCV, коинфекция HCV / ВИЧ с CD4 ≥ 500 / мм 3 и коинфекция с CD4 <500 / мм 3 были выполнены анализом анти-HCV архитектора и анализом HCV-RIBA соответственно. (A) Отношение S / CO антител против HCV пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1 с CD4 + T <500 / мм3 было значительно ниже, чем у пациентов с коинфекцией с CD4 + T ≥500 / мм3 и HCV-моноинфицированными пациентами. (B) Ответы против HCV, вызванные белками Core, NS3, NS4 и NS5 моноинфекции HCV, коинфекция HCV / ВИЧ с CD4 ≥ 500 / мм3 и коинфекция с CD4 <500 / мм3, были повторно протестированы методом HCV-RIBA. Интенсивность полос HCV оценивается по интенсивности внутренних контролей IgG как 5 различных уровней: 0 (none), +, ++, +++, ++++, согласно инструкциям производителя. Проводились U-тесты Манна Уитни, p <0,05 указывает на значимость.

В нескольких исследованиях было установлено, что определение HCV-coreAg с использованием платформы ARCHITECT было бы полезной стратегией мониторинга HCV-инфекции и периодов дискриминации с активной репликацией вируса от спонтанных разрешений. Этот подход можно было бы использовать в качестве дополнения к антивирусной терапии, основанной на ответе [13], [15]. В нашем исследовании все HCV-РНК-положительные образцы были также положительными для HCV-coreAg, что обеспечивало скорость обнаружения 100% HCV-coreAg. В соответствии с опубликованными данными [9], [13], [15], [21] наши данные также показали сравнительно высокую диагностическую чувствительность для количественного анализа HCV-coreAg.

В нашем продольном исследовании высокие корреляции между HCV-РНК и HCV-coreAg наблюдались как у пациентов с HCV-моноинфицированным, так и с HCV / HIV-1-коинфекцией как для генотипов 1b, так и для 2a HCV. Эти наблюдения подтверждают результаты других опубликованных данных, основанных на различных исследованиях поперечного сечения [9], [15] — [17], [21] — [23]. Наши результаты также показали, что корреляция между HCV-coreAg и HCV-РНК относительно стабильна в той же группе, даже в разные моменты времени. Взятый вместе, анализ HCV-coreAg является возможным альтернативным методом определения HCV-РНК.

Считается, что количество HCV-РНК постоянно пропорционально количеству HCV-coreAg в полных вирусных частицах. Christian et al. [24] предположили, что вариабельность отношения HCV-РНК и основного белка может быть дополнительным показателем для последующего лечения, а также предоставления информации о репликации HCV. Magali et al. [12] обнаружили, что у различных лиц с HCV-моноинфекцией были незначительные различия в количестве основного белка и HCV-РНК. Mederache et al. что значительная разница в отношении HCV-РНК / HCV-coreAg между ВИЧ-1 / HCV-, HBV / HCV- и HCV-инфицированными пациентами гемодиализа [25]. Однако характеристики переменных Ag / РНК у разных пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1 недостаточно изучены. В настоящем трехлетнем продольном исследовании мы наблюдали более высокие отношения Ag / РНК у пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1 с более низким числом лимфоцитов CD4 +. Кроме того, было обнаружено, что отношения Ag / RNA отрицательно коррелируют с количеством CD4 + T-клеток у пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1. Эти результаты показали, что различия в уровнях основного белка и HCV-РНК у пациентов с HCV / ВИЧ-1 с коинфекцией снижаются с уменьшением количества лимфоцитов CD4 +, хотя основной механизм остается неясным. Некоторые возможные объяснения связаны с идеей о том, что кинетика деградации HCV-coreAg и HCV-РНК в коинфекции HCV / ВИЧ отличается от кинетики моноинфекции HCV. Накопленная литература [26] — [29] продемонстрировала, что микробная транслокация является причиной системной иммунной активации при хронической ВИЧ-инфекции, которая характеризуется более высокими уровнями бактериальной ДНК плазмы и ЛПС у ВИЧ-инфицированных пациентов по сравнению с здоровым контролем. Учитывая такое явление, мы предположили, что расщепленные бактерии, вероятно, высвободят гораздо больше РНКазы в плазму иммунодепрессантов. В соответствии с этой теорией наши данные in vitro подтвердили идею о том, что большая нестабильность HCV-РНК в плазме ВИЧ может частично объяснять более высокие отношения Ag / РНК у пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1 с более низким числом лимфоцитов CD4 +. Кроме того, как показано на рисунке 5, пациенты с коинфекцией HCV / HIV-1 с нарушенной иммунной системой могут давать меньше антител против HCV-coreAg, чем пациентов с моноинфекцией HCV. Можно предположить, что антиядерные антитела могут мешать обнаружению HCV-сердечникаAg или сократить его период полувыведения в кровообращении, что может быть альтернативным объяснением различных соотношений Ag / RNA, наблюдаемых у пациентов с коинфекцией. Таким образом, на основе современных наблюдений количественное определение количества HCV-Ag в сыворотке могло бы достоверно отражать достоверный уровень копий HCV, чем определение HCV-РНК у пациентов с коинфекцией HCV / HIV с нарушенным иммунитетом. Однако мы не могли ни доказать, ни опровергнуть эту гипотезу в описанном здесь эксперименте, потому что ВИЧ-положительная и здоровая плазма не содержала антитела против HCV. С другой стороны, другие компоненты плазмы, такие как вирусные белки, липиды и микроРНК, могут также влиять на распад HCV-РНК и основного белка.

В заключение, наше продольное исследование показало, что HCV-coreAg представляет сопоставимую динамику как РНК HCV с течением времени у пациентов с хроническим HCV-инфицированием. Эти данные также показали, что отношение Ag / RNA имеет уникальные характеристики, которые варьируются между различными инфекционными состояниями и отрицательно коррелирует с количеством CD4 + Т-клеток у пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1.

TS и FL задумали исследование, подготовили экспериментальный протокол и рукопись. LL, JG и ZD провели эксперименты и проанализировали данные. TS, LL и HL способствовали написанию, пересмотру и пересмотру документа. Все авторы интерпретировали данные и критически оценивали проекты рукописи. Все авторы отредактировали и утвердили окончательную рукопись.

Дополнительный файл 1: Таблица S1: Клинические характеристики 73 ВГС-моноинфицированных и 66 пациентов с коинфекцией HCV / HIV-1, зарегистрированных в нашем продольном исследовании. (DOC 103 KB)

Дополнительный файл 2: Таблица S2. Клинические характеристики 7 ВИЧ-1-моноинфицированных пациентов и 8 здоровых лиц, включенных в исследование in vitro. (DOC 58 KB)

Ниже приведены ссылки на исходные файлы авторов для изображений. Исходный файл автора. Рисунок 1

Исходный файл авторов для рисунка 2

Исходный файл авторов для рисунка 3

Исходный файл авторов для рисунка 4

Исходный файл авторов для рисунка 5

Вирус гепатита c

Вирус иммунодефицита человека

Сердечный антиген вируса гепатита c

Поверхностный антиген гепатита В

антитело

Высокоактивная антиретровирусная терапия

Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы

азидотимидин

Диданозин

Ставудин

Ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы

невирапин

Аланин-аминотрансфераза

Аспартат-аминотрансфераза

γ глутамилтранпептидаза

Хемилюминесцентный иммуноанализ микрочастиц

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Мы благодарим всех пациентов и добровольцев, которые принимали участие в исследовании, и всех сотрудников Центра Шанцай по контролю и профилактике заболеваний за помощь в сборе образцов.

Эта работа была поддержана грантами Национального фонда естественных наук Китая (81271826), китайского проекта «863» (2012AA022605), Национального научного и технологического проекта по инфекционным заболеваниям (2012ZX10002003 и 2012ZX10002005) и Национального научного фонда Пекина (7122108).

Комментариев нет.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *